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cuipibird

银虫 (小有名气)

[求助] 怎样诱导大肠杆菌对不可溶性包涵体的表达?

我想获得由大肠杆菌培养产生的不可溶性包涵体,但是老是得到可溶性的蛋白,不知道怎样控制条件,对吸光度,温度,氧气,诱导剂,培养时间有什么特殊要求?
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biowandy

木虫 (正式写手)

哥们,你是人才,人家是要可溶的,不要包涵体,你也好包涵体不要可溶的, 为啥啊


不过给你一个意见,第一37度培养,第二,iptg诱导浓度增加到10mM,第三 在od到1以后再诱导,培养时间4小时够了,最好减少氧气供应,比如在诱导的时候把体积加大,

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2楼2012-04-29 22:56:48
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cuipibird

银虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by biowandy at 2012-04-29 22:56:48:
哥们,你是人才,人家是要可溶的,不要包涵体,你也好包涵体不要可溶的, 为啥啊


不过给你一个意见,第一37度培养,第二,iptg诱导浓度增加到10mM,第三 在od到1以后再诱导,培养时间4小时够了,最好减少氧气 ...

呵呵,大家研究的方向不同,如果用包涵体的话得到的目的蛋白比较纯谢谢啦!
3楼2012-04-30 08:02:35
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bbnxmc

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by cuipibird at 2012-04-30 08:02:35
呵呵,大家研究的方向不同,如果用包涵体的话得到的目的蛋白比较纯谢谢啦!...

刚入此行,长知识了……加油
4楼2014-06-24 20:52:27
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