24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3077  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

castlered

木虫 (小有名气)

[求助] 问问pet-28a克隆构建引物的问题

如果设计带C端his的引物,是不是下游只能用NCoI这个酶切位点啊,XbaI和NcoI之间的RBS对C端his表达有影响么,需要保留它么?
附pet-28a图谱
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

castlered

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by susizheng at 2012-04-17 11:15:06:
不对,RBS(核糖体附着位点)是紧跟启动子和操纵子的,在起始密码子ATG之前,怎么会跑到终止密码子后面呢?看质粒图谱方向反了吧。

pet-28a质粒不是可以构建N端his和C端his么?N端当然是正常的了,rbs在2启动子之后,ATG之前。但是用C端his呢?
6楼2012-04-17 11:18:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

太极拳

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
castlered: 金币+1, ★★★很有帮助 2012-04-17 13:36:39
rbs序列不要去除,可以设计引物时加上其他的酶切位点紧连上his序列即可,注意加上保护碱基,另外要注意碱基数量,别导致发生移码,以至于没法表达His
2楼2012-04-17 10:28:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

castlered

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 太极拳 at 2012-04-17 10:28:26:
rbs序列不要去除,可以设计引物时加上其他的酶切位点紧连上his序列即可,注意加上保护碱基,另外要注意碱基数量,别导致发生移码,以至于没法表达His

如果是N端his肯定要保留rbs,C端也要么?C端不是从C端开始表达的么,rbs都在终止密码子后面,有意义么?
3楼2012-04-17 10:52:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流。 2012-04-17 19:49:21
引用回帖:
3楼: Originally posted by castlered at 2012-04-17 10:52:58:
如果是N端his肯定要保留rbs,C端也要么?C端不是从C端开始表达的么,rbs都在终止密码子后面,有意义么?

不对,RBS(核糖体附着位点)是紧跟启动子和操纵子的,在起始密码子ATG之前,怎么会跑到终止密码子后面呢?看质粒图谱方向反了吧。
Thank-you,so-blue.
4楼2012-04-17 11:15:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料科学与工程320求调剂,080500 +7 黄瓜味薯片 2026-04-06 7/350 2026-04-06 22:38 by qlm5820
[考研] 362求调剂 +5 我要考大 2026-04-06 7/350 2026-04-06 21:27 by 啵啵啵0119
[考研] 材料调剂 +10 一样YWY 2026-04-06 10/500 2026-04-06 21:05 by lbsjt
[考研] 一志愿武汉理工大学080200机械工程308分,求调剂 +4 终不似从前 2026-04-05 4/200 2026-04-06 11:46 by 考研学校招点人
[考研] 求调剂求调剂 +8 121. 2026-04-02 8/400 2026-04-05 20:15 by lys0704
[考研] 298求调剂 +3 manman511 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:09 by kk112233
[考研] 调剂 +5 好好读书。 2026-04-01 5/250 2026-04-05 17:54 by liucky
[考研] 专硕310求调剂 +5 捞捞我…. 2026-04-04 6/300 2026-04-04 23:33 by barlinike
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 321求调剂 +6 认真求上学 2026-04-03 6/300 2026-04-04 19:51 by dongzh2009
[考研] 11408 一志愿西电,277分求调剂 +4 zhouzhen654 2026-04-03 4/200 2026-04-04 18:10 by 猪会飞
[考研] 一志愿沪985,326分求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-03 3/150 2026-04-04 11:16 by 悲伤的芋头
[考研] 一志愿北京科技大学材料工程085601,求调剂 +17 cdyw 2026-04-02 18/900 2026-04-04 11:14 by w_xuqing
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
[考研] 调剂0855-288 +5 x熊二a 2026-04-03 5/250 2026-04-04 00:19 by 猪会飞
[考研] 285求调剂 +5 AZMK 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by AZMK
[考研] 085600专硕材料与化工348分求调剂 +10 上学啦! 2026-04-01 11/550 2026-04-03 14:13 by 百灵童888
[考研] 366求调剂 +7 sbdnd 2026-04-03 7/350 2026-04-03 12:40 by cymywx
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +9 哇呼哼呼哼 2026-04-02 9/450 2026-04-03 12:05 by 1753564080
[考研] 求调剂22408 288分 +5 new382 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:13 by 醉在风里
信息提示
请填处理意见