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lyani

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 5.8
帖子: 2
在线: 43分钟
虫号: 1250942

[交流] 关于酵母抗zeocin时间问题

GS115本身是没有zeocin抗性的。
但是为了确保万无一失，我将GS115挑单菌落，30°C 摇16h，菌液在OD600为0.3左右，涂200ul于 YPD+zeocin（博来霉素终浓度为100ug/ml）上，30°C避光培养，但是72个小时就长了很小的菌落。是zeocin失效了，还是什么其他问题？还是我在涂板的时候就应该避光操作？

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1楼 2012-04-16 10:25:42

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

一休陈

金虫 (正式写手)

应助: 1 (幼儿园)
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虫号: 970791

★
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引用回帖:

6楼: Originally posted by reallpf at 2012-09-09 19:57:27
关于Zeocin抗性的使用，一般大肠是100mL培养基加25uL就足够，但是要是LLB，不能使用LB，高盐浓度会降低Zeocin效率。
对于酵母，100mL培养基加40-50uL足矣。
而且Zeocin抗性的筛选效率一般比较低，长得菌落数会少， ...

请问你的博来霉素的母液浓度是100mg/mL吗？