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lyani

新虫 (初入文坛)


[交流] 关于酵母抗zeocin时间问题

GS115本身是没有zeocin抗性的。
但是为了确保万无一失,我将GS115挑单菌落,30°C 摇16h,菌液在OD600为0.3左右,涂200ul于 YPD+zeocin(博来霉素终浓度为100ug/ml)上,30°C避光培养,但是72个小时就长了很小的菌落。是zeocin失效了,还是什么其他问题?还是我在涂板的时候就应该避光操作?
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lyani

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 墨香若水 at 2012-04-16 10:32:33:
涂板没必要避光操作,我以前都是用25-50ug/ml  可能菌体太浓的原因吧 也可能Z失效   直接挑单菌落画板看会不会长~

谢谢。
3楼2012-04-16 10:41:33
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墨香若水

木虫 (著名写手)



lyani(金币+1): 谢谢参与
涂板没必要避光操作,我以前都是用25-50ug/ml  可能菌体太浓的原因吧 也可能Z失效   直接挑单菌落画板看会不会长~
2楼2012-04-16 10:32:33
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元雪浈

银虫 (初入文坛)



lyani(金币+1): 谢谢参与
遇到和楼主相似的问题,我是将大肠杆菌划线与含zeocin的LB平板的,24小时不长,但是,36小时就长出来了很微小的菌落,是zecin长时间失效了么?我要挑选的是用于做电转化实验用的,在zeoxin上不长的菌,这可怎么挑 啊
4楼2012-09-08 10:13:33
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啊Q精神

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
zeocin不是100%有效的,说明书上应该有说明了有效成分占多少
操作手册上是涂多少?
G418的话是涂10的5次方个细胞到一块板,1OD1ml好像是5乘10的7次方个细胞
5楼2012-09-09 17:39:30
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