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zhang8826857

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 求解释这pcr是啥问题,帮同学问的^_^

这是以质粒为模板,扩增质粒上的EGFP基因,结果没扩出来,是不是模板的量加的太大呀?跑出来的条带是模板吧?我提质粒之后,50ul的pcr体系加了模板0.5微升,没做出来,然后我把提的质粒稀释了10倍,加0.5ul又没做出来,连条带都没有,大家帮着分析下士啥问题呀?(最右边是天根Marker3,200bp,500,800,1200,2000,3000,4500bp,目的片段应该是700左右,从右边数第二三个不是,是帮别人跑了两个样,其余的是pcr的结果


[ Last edited by zhang8826857 on 2012-4-5 at 09:37 ]
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王雨云

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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zhang8826857: 金币+5, 有帮助 2012-04-05 15:52:34
可以直接做菌落PCR看看,再把你提的质粒做个酶切,确保你的目的片断在里面
12楼2012-04-05 15:45:03
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