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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】荧光定量PCR敏感度差是什么原因？探针法
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zhyp_77

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】荧光定量PCR敏感度差是什么原因？探针法 已有6人参与

我自己设计的探针和引物，并构建的标准品，可是1000copies都检不出来。急求解决办法。（上海生工合成的引物和探针）。
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1楼 2010-05-14 18:35:21
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zhangdapeng

木虫 (著名写手)
★
zhyp_77(金币+2):谢谢参与
zhyp_77(金币+2): 2010-05-14 18:55:53
再从别的公司订购引物看看，或打电话给生工问问是否有问题，有一次生工打电话给我们说那一批的引物都有问题，收回后重新合成给我们
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2楼2010-05-14 18:39:10
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★
zhyp_77(金币+2):谢谢参与
探针或引物的问题？
模板的问题？
还是PCR的过程有问题？
从你说的看不出来是哪地方的问题
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3楼2010-05-14 20:06:17
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
zhyp_77(金币+2):谢谢参与
标准品是质粒吧，这个环节如果没有问题，一般就是引物和探针设计的问题，肯定是引物或者探针存在非特异性结合，可以试试多加好不好用，如果不行围绕探针再设计几对引物，看有没有效，如果还是不行，那就只能探针引物一起重新设计了
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4楼2010-05-14 20:18:48
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aijiangshan

木虫 (著名写手)
★
zhyp_77(金币+2):谢谢参与
引物是个大原因
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5楼2010-05-14 20:48:53
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yuyixst

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1000copys应该算是极限的了，你测的是什么东西，要优化下你的体系的
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6楼2010-05-14 21:43:21
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点点336

金虫 (小有名气)
查一下就知道了
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为科研贡献力量
7楼2010-05-14 22:46:18
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