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关于western blot的小问题
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autumnfang
金虫
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虫号: 989292
[交流]
关于western blot的小问题
刚开始做western blot ,每次做都是不出结果,我的目的蛋白分子量58kd。
主要问题有1、跑胶之后marker中红色的那一条下面只有两条蓝色的带
2、曝光之后胶片没有任何东西。
[/img]
[/img]
我在想是不是我电转的时间过长,将蛋白转没了
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1楼
2012-04-03 16:11:19
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晴天1882
木虫
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★
autumnfang(金币+1): 谢谢参与
如果没错,电泳中marker红色的带分子量是72,下面的两条蓝色的带是55和43,你都58应该是在红色和下一条蓝色之间,这都没跑出来,后面肯定显影不出来啦,先看看电泳方面的问题吧!
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9楼
2012-04-04 10:38:44
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userhung
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★
autumnfang(金币+1): 谢谢参与
操作上是否有问?
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2楼
2012-04-03 16:41:22
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autumnfang
金虫
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(幼儿园)
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虫号: 989292
引用回帖:
2楼
:
Originally posted by
userhung
at 2012-04-03 16:41:22:
操作上是否有问?
我注意操作了 只是实验过程中pvdf膜稍微有些干
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3楼
2012-04-03 17:22:07
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超然渡陈
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★
autumnfang(金币+1): 谢谢参与
你转膜的时候用的电压和电流分别是多少?转膜多长时间?建议你转膜之后用考马斯蓝染液对胶进行染色,膜上没有蛋白的话要看一下蛋白是否残留在胶上。
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4楼
2012-04-03 20:17:43
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