应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么？
51/1返回列表
查看: 3989  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xiaoyang123

金虫 (小有名气)

[交流] PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么？

关于PCR的退火温度，以前一直认为温度提高特异性增强，但是太高的话会导致引物难以与模板接合，无法扩增出目的条带，而温度降低的话，可能非特异性不那么强，可能会扩增出杂带，但是目的条带也能扩出来。因此为了保证得到目的条带，往往倾向于选择较低的退火温度。然而实验中发现，温度较低时，有时扩增效果反而不好，目的条带很淡很淡。

是否退火温度过低，除了导致非特异性扩增增强，也会导致目的条带无法扩出呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2012-03-22 20:08:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

跳跳鱼

木虫 (著名写手)
★ ★
xiaoyang123(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-03-25 14:16:20
那你就尝试做一个温度梯度PCR找找合适的温度，达到最佳效果
赞一下 回复此楼
4楼2012-03-23 20:02:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

rommel1941

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
xiaoyang123(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-03-25 14:15:55
xiaoyang123: 金币+1 2012-03-27 19:31:00
PCR中可以调整的条金不止Tm一个，Mg浓度、引物、模版情况等都可以进行优化，不要纠结在这一个问题上。
赞一下 回复此楼
2楼2012-03-22 22:53:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huaigong5

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
xiaoyang123(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+1, 有道理 2012-03-25 14:16:03
xiaoyang123: 金币+3 2012-03-27 19:31:57
如果引物特异性不好，非特异条带大量消耗DNTP等因子，就很可能P不出目的条带。
赞一下 回复此楼
3楼2012-03-23 04:48:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imyting

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
xiaoyang123(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-03-25 14:16:13
会的，退火温度太低会导致引物大量与非特异性位点结合，导致目的基因的扩增出现问题，比如dNTP的消耗等
赞一下 回复此楼
5楼2012-03-23 22:34:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 354求调剂 +6 Tyoumou 2026-03-18 9/450 2026-03-21 20:47 by lbsjt
[考研] 考研调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +14 chaojifeixia 2026-03-19 15/750 2026-03-21 13:24 by zhukairuo
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +10 冷笙123 2026-03-17 10/500 2026-03-21 01:54 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 材料，纺织，生物（0856、0710），化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 070300化学学硕求调剂 +6 太想进步了0608 2026-03-16 6/300 2026-03-16 16:13 by kykm678
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭