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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么？
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xiaoyang123

金虫 (小有名气)

[交流] PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么？

关于PCR的退火温度，以前一直认为温度提高特异性增强，但是太高的话会导致引物难以与模板接合，无法扩增出目的条带，而温度降低的话，可能非特异性不那么强，可能会扩增出杂带，但是目的条带也能扩出来。因此为了保证得到目的条带，往往倾向于选择较低的退火温度。然而实验中发现，温度较低时，有时扩增效果反而不好，目的条带很淡很淡。

是否退火温度过低，除了导致非特异性扩增增强，也会导致目的条带无法扩出呢？
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1楼 2012-03-22 20:08:27
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imyting

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
xiaoyang123(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-03-25 14:16:13
会的，退火温度太低会导致引物大量与非特异性位点结合，导致目的基因的扩增出现问题，比如dNTP的消耗等
赞一下 回复此楼
5楼2012-03-23 22:34:49
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