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PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么?
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xiaoyang123
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[交流]
PCR退火温度态度会导致扩增不出目的条带么?
关于PCR的退火温度,以前一直认为温度提高特异性增强,但是太高的话会导致引物难以与模板接合,无法扩增出目的条带,而温度降低的话,可能非特异性不那么强,可能会扩增出杂带,但是目的条带也能扩出来。因此为了保证得到目的条带,往往倾向于选择较低的退火温度。然而实验中发现,温度较低时,有时扩增效果反而不好,目的条带很淡很淡。
是否退火温度过低,除了导致非特异性扩增增强,也会导致目的条带无法扩出呢?
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