| 查看: 3831 | 回复: 28 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
amq7392铁杆木虫 (著名写手)
|
[求助]
求教离子交换柱纯化蛋白的问题
|
|
|
本人用DEAE Sepharose FF纯化一种酶，柱子为1.6X30cm，柱床高约20cm，上样缓冲液20mM Tris-HCl，用0—0.5M NaCl梯度洗脱，流速约2ml/min。问题是：在整个梯度洗脱过程中仅出现一个很大的峰，峰高A280不到0.02，但特别宽，三四个小时才出完，经检测酶活，我的目标产物就存在于整个峰中。我重复了两三次，都是这种情况，请问这是怎么回事？是我装柱有问题还是洗脱条件有问题？还有就是，当梯度完后，高盐洗脱时（1M NaCl），柱床高度下降明显，有两三个厘米，这是怎么回事呢？谢谢各位！ [ Last edited by amq7392 on 2012-3-13 at 19:24 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有6人回复
-
延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容
已经有5人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有23人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白纯化遇到问题
已经有22人回复
- AMPK蛋白纯化问题讨论
已经有21人回复
- 蛋白互作必会，GST纯化遇到的问题
已经有13人回复
- 进行羟胺裂解后，进行蛋白的二次过亲和层析住纯化问题！！！！求助啊 ！！！
已经有9人回复
- 蛋白纯化分离问题
已经有19人回复
- 关于蛋白纯化的问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】蛋白质纯化的疑难问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】蛋白纯化中透析的问题！！
已经有9人回复
- 【求助/交流】请教一个his-tag蛋白质纯化问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于分子筛纯化蛋白的问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】蛋白纯化后透析及浓缩问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】关于蛋白纯化
已经有30人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
amq7392
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 5031.6
- 散金: 63
- 红花: 9
- 帖子: 1205
- 在线: 784.7小时
- 虫号: 597481
- 注册: 2008-09-09
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2012-03-15 08:48:10
2楼2012-03-14 21:32:20
lihuan0525
金虫 (职业作家)
- BioEPI: 1
- 应助: 565 (博士)
- 金币: 2155
- 散金: 687
- 红花: 15
- 帖子: 3301
- 在线: 551.8小时
- 虫号: 1292024
- 注册: 2011-05-11
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
3楼2012-03-14 22:30:15
lzgxgz
至尊木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 71 (初中生)
- 金币: 12539.5
- 红花: 3
- 帖子: 905
- 在线: 357.4小时
- 虫号: 1561045
- 注册: 2012-01-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2012-03-15 08:46:51
