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关于以基因组为模板的PCR,求教条件的优化
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最近以基因组为模板做PCR 设计了各种引物 从250bp - 1KB产物的都有 但是总是出现以下几种情况: 1、不是所有的样本都可以P出目的条带(我确定样本中肯定是有目的片段的) 2、P出的条带特异性不强,总是有杂带 用的酶有一般的Taq 、 Takara Taq HS 、KOD、KOD PLUS== 体系是按照每个酶的说明配制的 特异性不强的话 我就升高温度P 可是还是有类似Smear的东西 一般大家怎么优化条件呢 求教 |
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