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zoeye

金虫 (小有名气)

[求助] 关于以基因组为模板的PCR，求教条件的优化

最近以基因组为模板做PCR
设计了各种引物
从250bp - 1KB产物的都有
但是总是出现以下几种情况：
1、不是所有的样本都可以P出目的条带（我确定样本中肯定是有目的片段的）
2、P出的条带特异性不强，总是有杂带
用的酶有一般的Taq  、 Takara Taq HS 、KOD、KOD PLUS==
体系是按照每个酶的说明配制的
特异性不强的话 我就升高温度P 可是还是有类似Smear的东西
一般大家怎么优化条件呢
求教
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1楼 2012-03-07 21:33:28
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a731705125

银虫 (小有名气)
特异性不强可以看看引物的序列吧
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2楼2012-03-07 21:54:46
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