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一笑而过0987

铜虫 (正式写手)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳问题

最近做的琼脂糖凝胶电泳实验出了问题很苦恼,marker条带清晰,目的条带有的清晰有的没有,引物二聚体非常多,比目标条带还清楚。
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一笑而过0987

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 198903133397 at 2012-03-02 09:21:03:
体系是否和原来一样,不同体系之间也有差异

都是一样的,前一天好好地,后一天就这么奇怪了。
7楼2012-03-02 09:31:06
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查看全部 15 个回答

karin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-03-01 17:04:12
目的条带不清晰可能是你的PCR产物浓度低,可以加大上样量看看到底有没有目的条带。你可以把PCR体系中引物量降低,你的引物加的过多了,不过也有可能是你的引物本身就容易形成二聚体,先降低量看看吧。由你的描述看,你的
PCR体系或扩增程序需优化。
坚持就是胜利
2楼2012-03-01 12:28:01
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一笑而过0987

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by karin at 2012-03-01 12:28:01:
目的条带不清晰可能是你的PCR产物浓度低,可以加大上样量看看到底有没有目的条带。你可以把PCR体系中引物量降低,你的引物加的过多了,不过也有可能是你的引物本身就容易形成二聚体,先降低量看看吧。由你的描述看 ...

加样量增加了二倍,还是和原来一样。
3楼2012-03-01 18:01:20
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一笑而过0987

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 一笑而过0987 at 2012-03-01 18:01:20:
加样量增加了二倍,还是和原来一样。

按照同样的体系,之前做过,结果还挺好的,最近就这样了。
4楼2012-03-01 18:02:54
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