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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问哪位高手用琼脂糖电泳跑过蛋白？
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魏慧芳

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问哪位高手用琼脂糖电泳跑过蛋白？

我用琼脂糖跑蛋白，条带总是拖尾，染色后条带前沿和加样槽之间形成蓝色的一片，长方形，这是为什么呢？还不像正常的拖尾，求高手指教！！！
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1楼 2012-02-08 21:51:24
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rainblue007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-02-10 13:38:44
魏慧芳(金币+3): ★★★很有帮助 2012-02-10 14:07:46
本人跑过两年琼脂糖-蛋白电泳，这种情况，建议调整琼脂糖浓度，还有，电泳液不能加太多，刚刚没过胶面就行了。
赞一下(4人) 回复此楼
6楼2012-02-10 12:25:28
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rainblue007

金虫 (小有名气)
小丹木木(金币+3): 鼓励应助 2012-02-16 13:33:46
引用回帖:
7楼: Originally posted by 魏慧芳 at 2012-02-10 14:07:17:
太感谢了！我有一种蛋白，在pH8.6的时候，理论上应该带正电，跑向阴极，可我做的总是跑向阳极，实在想不出为什么？求指点！

琼脂糖-蛋白电泳，如果需要样品带负电，处理时也会加一定量的SDS。像你这种情况，需要的是样品带正电，那就千万不能加SDS，或者有类似功能的试剂，你好好检查一下你的上样缓冲液、电泳缓冲液成分的和pH，需要严格控制，有条件的话一定要用准确度高的pH计，pH试纸就算了，太不准了。祝好运！
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8楼2012-02-16 09:39:08
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