24小时热门版块排行榜    

查看: 1619  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zw198626

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 请教一个基因的扩增,TA克隆问题

各位大侠,
小弟最近在用mRNA扩增一个基因,跑胶后电泳带子特异。直接用PCR产物未经纯化或切胶纯化直接做TA克隆。抽提转化子的质粒,跑胶将变大的质粒送测序。但是得到的连接产物,经测序发现大小正确,但是序列为一段没有任何意义的DNA序列。在NCBI做blast也找不到任何匹配的序列。不知各位有没有这样的经历?或有大侠给指点下迷津的?

再次拜谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小丹木木(金币+2, 专家考核): 运气还不错了。仰慕ing 2012-02-03 13:41:09
昨天拿到的测序结果也是这样,克隆的是植物的基因,连到载体上后,用M13f测得结果,blast得到的是大肠杆菌的细胞分裂基因序列!!还好有一个正确的!!
jiayoubashaonian
3楼2012-02-03 11:14:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

ivxy

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 有道理 2012-02-03 13:39:44
zw198626: 金币+10, 有帮助 2012-04-28 09:33:07
1、非编码区
2、扩到内含子序列
3、基因在该段的变异大,不同物种的该基因差异也比较大
4、PCR扩增中的错配
2楼2012-02-03 11:08:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cgspider

木虫 (正式写手)

碰到过,提交后说是genbank里 没有相似序列。。。
你的能力撑不起你的野心
4楼2012-02-06 16:15:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zw198626

铁杆木虫 (小有名气)

各位,除了多挑克隆测序外还有什么好的解决办法么?
5楼2012-02-08 10:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖? +4 CrisMessi 2026-08-18 4/200 2026-08-19 00:53 by gatelove
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 27/1350 2026-08-18 21:44 by Noways
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 朋友圈看到的 +4 wangzilk 2026-08-18 5/250 2026-08-18 19:25 by wangzilk
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +51 医学老男孩 2026-08-13 110/5500 2026-08-18 19:07 by icerianxia
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +8 基诺咪客 2026-08-17 11/550 2026-08-18 17:13 by 悠然熊猫
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
信息提示
请填处理意见