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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教一个基因的扩增，TA克隆问题
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zw198626

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 请教一个基因的扩增，TA克隆问题

各位大侠，
小弟最近在用mRNA扩增一个基因，跑胶后电泳带子特异。直接用PCR产物未经纯化或切胶纯化直接做TA克隆。抽提转化子的质粒，跑胶将变大的质粒送测序。但是得到的连接产物，经测序发现大小正确，但是序列为一段没有任何意义的DNA序列。在NCBI做blast也找不到任何匹配的序列。不知各位有没有这样的经历？或有大侠给指点下迷津的？

再次拜谢！
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1楼 2012-02-03 10:16:40
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ivxy

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 有道理 2012-02-03 13:39:44
zw198626: 金币+10, ★有帮助 2012-04-28 09:33:07
1、非编码区
2、扩到内含子序列
3、基因在该段的变异大，不同物种的该基因差异也比较大
4、PCR扩增中的错配
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2楼2012-02-03 11:08:02
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