24小时热门版块排行榜

南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

妙赞爆米花

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 5
帖子: 14
在线: 4.2小时
虫号: 1551664
注册: 2011-12-26
专业: 园林学

[求助] 荧光定量扩增曲线与融解曲线分析

刚开始做荧光定量，有关扩增曲线和溶解曲线的问题想要请教高手?扩增曲线如图1：为什么在刚出现平台期后2、3个循环又有上升，这种情况应该怎么改善PCR体系或条件？
溶解曲线如图2：融解温度从55度到95度，55到退火温度87度间不平整的微小峰值是什么意思，这样的曲线能用吗，还是引物仍有问题？

图1 扩增曲线

图2 融解曲线

融解曲线

回复此楼

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有243人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

荧光定量PCR扩增效率怎么做？？？？我要被逼疯了已经有17人回复
荧光定量扩增效率低怎么办已经有3人回复
荧光定量曲线问题已经有5人回复
求高手解救荧光定量的问题已经有6人回复
标准菌株建立荧光定量PCR的标准曲线已经有5人回复
请教荧光定量软件溶解曲线smooth功能的问题已经有4人回复
定量PCR融解曲线问题已经有5人回复
【求助】几个关于实时定量PCR的问题已经有12人回复
【求助/交流】荧光定量融解曲线怪异已经有6人回复
【求助/交流】荧光定量pcr出现直线扩增曲线，求指导已经有5人回复
【求助/交流】今天做的Rea Time PCR怎么看不到融解曲线？是不是前面设置出现了问题？已经有8人回复
【求助/交流】荧光PCR扩增曲线问题已经有18人回复
【求助/交流】实时荧光定量PCR的扩增效率低该如何改进？已经有5人回复
【专题】real time pcr目的基因的融解曲线不明白已经有8人回复

1楼2011-12-26 11:44:22

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

妙赞爆米花

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 5
帖子: 14
在线: 4.2小时
虫号: 1551664
注册: 2011-12-26
专业: 园林学

送鲜花一朵
妙赞爆米花: 回帖置顶 2011-12-27 19:51:00

引用回帖:

楼: Originally posted by haiven at 2011-12-27 08:22:39:
从个人实际经验来讲，你的结果应该是没有问题的，可以放心使用。引物的扩增效率、特异性和模板的量都是合适的，Ct值也在合适的范围。重复性也很好。只是你为什么只做两个重复呢？原则上应该至少是三个重复呢？

呵呵，谢谢回复
是做了3次重复，但有一个样可能是加样的时候出问题了，曲线不太好，我就给剔出去了。
我想请教下，我的扩增曲线属正常吗，为什么平台期后会又有上升呢，能帮忙分析下原因吗？