应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量扩增曲线与融解曲线分析
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 4357  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

妙赞爆米花

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量扩增曲线与融解曲线分析

刚开始做荧光定量，有关扩增曲线和溶解曲线的问题想要请教高手?扩增曲线如图1：为什么在刚出现平台期后2、3个循环又有上升，这种情况应该怎么改善PCR体系或条件？
溶解曲线如图2：融解温度从55度到95度，55到退火温度87度间不平整的微小峰值是什么意思，这样的曲线能用吗，还是引物仍有问题？

图1 扩增曲线



图2 融解曲线



融解曲线
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-26 11:44:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

妙赞爆米花

新虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
妙赞爆米花: 回帖置顶 2011-12-27 19:51:00
引用回帖:
楼: Originally posted by haiven at 2011-12-27 08:22:39:
从个人实际经验来讲，你的结果应该是没有问题的，可以放心使用。引物的扩增效率、特异性和模板的量都是合适的，Ct值也在合适的范围。重复性也很好。只是你为什么只做两个重复呢？原则上应该至少是三个重复呢？

呵呵，谢谢回复
是做了3次重复，但有一个样可能是加样的时候出问题了，曲线不太好，我就给剔出去了。
我想请教下，我的扩增曲线属正常吗，为什么平台期后会又有上升呢，能帮忙分析下原因吗？
赞一下 回复此楼
8楼2011-12-27 09:19:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

妙赞爆米花

新虫 (初入文坛)
有没有高手在线，帮忙分析下？？
赞一下 回复此楼
2楼2011-12-26 11:49:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuandian114

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking(金币+3): 鼓励积极应助！ 2011-12-26 18:06:38
LZ放心吧，你的定量引物没有任何问题，做出来的图也很漂亮，放到论文上是不会有任何问题的。
从融解曲线来看的话，你得扩增产物是单一的（在主峰之前的亚峰不影响结果），如果LZ还不放心的话建议LZ可以讲扩增产物跑个琼脂糖电泳
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

妙赞爆米花
3楼2011-12-26 13:43:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhujiumei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
或许存在蒸发，引物感觉也不是特别好。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

妙赞爆米花
4楼2011-12-26 20:41:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂学校 +7 不会吃肉 2026-04-13 7/350 2026-04-14 11:09 by LNTU-smj
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 297求调剂 +22 ORCHID1 2026-04-10 25/1250 2026-04-13 23:11 by pies112
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 一志愿双非085400电子信息344 求调剂，对材料和化学方向也感兴趣 +12 无情的小羊 2026-04-09 13/650 2026-04-13 14:17 by 张zhihao
[考研] 346分，工科0854求调剂，专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[考研] 295分求调剂 +13 ?要上岸? 2026-04-10 13/650 2026-04-12 15:37 by laoshidan
[找工作] 山东高校教师考核超级无底线，员工过不下去啦 +4 qut2026 2026-04-09 9/450 2026-04-12 00:54 by qut2026
[考研] 291分调剂 +5 上岸小莹加油 2026-04-09 6/300 2026-04-11 21:06 by 逆水乘风
[考研] 调剂求助 +6 果然有我 2026-04-11 7/350 2026-04-11 16:22 by 明月此时有
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 087100初试311求调剂 +4 任雅琴 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:33 by zhq0425
[考研] 广东省 085601 329分求调剂 +14 Eddieddd 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:58 by bljnqdcc
[考研] 284求调剂 +12 archer.. 2026-04-10 13/650 2026-04-11 08:44 by zhq0425
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +6 白云123456789 2026-04-09 8/400 2026-04-10 21:13 by zhouxiaoyu
[考研] 材料专业344求调剂 +16 hualkop 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 17:28 by laoshidan
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 367求调剂 +10 hffQAQ 2026-04-09 10/500 2026-04-09 18:06 by lijunpoly
[考研] 349学科化学045106求调剂，化学类都可以 +8 保好懂懂 2026-04-08 8/400 2026-04-09 14:03 by xulei3024
[考研] 电子信息346 +4 zuoshaodian 2026-04-08 4/200 2026-04-08 11:54 by zzucheup
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭