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XUMIN6891金虫 (初入文坛)
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连接与转化问题
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| 各位高手你们好！我想请教大家一个问题：我最近做基因串联，我的基因是重复的片段，我分别扩出两段大小相同的片段，大小都是357bp，然后通过中间设计的一个相同的限制性内切酶（HindIII)，然后我在一个体系里把这两段片段和载体连接起来，跟载体连接时我选的两端的酶是（EcoR I,Xho I),然后就是转化，挑菌，但是提完重组质粒用它做pcr鉴定是啥也没做出来，做双酶切时有两条带但是那个小片段的条带按说连上应该是684bp，但是跑电泳确在750bp处，我用的是2000bp的Market，这是不是意味着我连上的不对啊，高手指导指导啊！谢谢了！或者有谁能给指条更好地连接方法，针对这种重复片段需要串联的，谢谢了！ |
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