| 查看: 1529 | 回复: 5 | ||
XUMIN6891金虫 (初入文坛)
|
[求助]
连接与转化问题
|
| 各位高手你们好！我想请教大家一个问题：我最近做基因串联，我的基因是重复的片段，我分别扩出两段大小相同的片段，大小都是357bp，然后通过中间设计的一个相同的限制性内切酶（HindIII)，然后我在一个体系里把这两段片段和载体连接起来，跟载体连接时我选的两端的酶是（EcoR I,Xho I),然后就是转化，挑菌，但是提完重组质粒用它做pcr鉴定是啥也没做出来，做双酶切时有两条带但是那个小片段的条带按说连上应该是684bp，但是跑电泳确在750bp处，我用的是2000bp的Market，这是不是意味着我连上的不对啊，高手指导指导啊！谢谢了！或者有谁能给指条更好地连接方法，针对这种重复片段需要串联的，谢谢了！ |
回复此楼» 猜你喜欢
0703化学336分求调剂
已经有4人回复
-
[复试调剂]西南科技大学国防/材料导师推荐
已经有6人回复
-
化学工程321分求调剂
已经有12人回复
-
211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习
已经有4人回复
-
材料专硕326求调剂
已经有5人回复
-
东南大学364求调剂
已经有5人回复
-
国自科面上基金字体
已经有7人回复
-
药学383 求调剂
已经有4人回复
-
286求调剂
已经有5人回复
-
085601求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为什么最近做连接转化总是失败
已经有20人回复
- 请教一下连接与转化问题！
已经有11人回复
- 连接转化不成功问题
已经有17人回复
- 求助关于转化的问题？
已经有22人回复
- 目的基因连接pGEX-6p-1进行转化的问题
已经有14人回复
- 胶回收产物连接转化后菌液PCR电泳条带出现问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】关于酶切连接转化的问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】连接转化时遇到的奇怪问题 求解
已经有12人回复
- 【求助/交流】连接转化长菌有质粒，但是没有目的片段，怎么回事？？
已经有20人回复
- 【求助/交流】请教连接转化方面的问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】大片段连接转化成功与否问题
已经有11人回复
- 【求助/交流】长片段的连接转化
已经有9人回复
gongeleven
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 55 (初中生)
- 金币: 7107.8
- 散金: 222
- 红花: 3
- 帖子: 432
- 在线: 152.9小时
- 虫号: 1082982
- 注册: 2010-08-27
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2011-12-22 09:05:49
yabxxh
木虫 (正式写手)
- BioEPI: 11
- 应助: 22 (小学生)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 2238
- 散金: 98
- 红花: 9
- 帖子: 465
- 在线: 88.6小时
- 虫号: 157001
- 注册: 2006-01-05
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
3楼2011-12-22 11:31:28
XUMIN6891
金虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1015.5
- 帖子: 41
- 在线: 19.1小时
- 虫号: 1127506
- 注册: 2010-10-20
- 性别: MM
- 专业: 兽医传染病学
4楼2011-12-22 19:39:56
20083630zhan
木虫 (正式写手)
- 应助: 28 (小学生)
- 金币: 2739.2
- 散金: 39
- 帖子: 376
- 在线: 332小时
- 虫号: 2009205
- 注册: 2012-09-18
- 性别: GG
- 专业: 有机金属化学
5楼2013-05-19 09:40:24
yuanbo934
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 29 (小学生)
- 金币: 24999.5
- 红花: 4
- 帖子: 2921
- 在线: 230.1小时
- 虫号: 462771
- 注册: 2007-11-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
6楼2013-05-19 22:38:41
