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fangxia1007

金虫 (初入文坛)

[求助] 求解释!PCR产物在目的区有很亮的拖尾!需要回收目的片段!怎么办啊?

我的片段5.1kb,PCR扩增跑胶成这样了,有严重的弥散拖尾,怎么回事!该怎样优化呢?求助大家出出主意

PCR扩增5.1kb基因电泳图
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pophust

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR失败了。 感觉像是酶加少了。还有要看看primer的melting temperature
3楼2011-12-17 23:41:34
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panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
fangxia1007(金币+3): 提高退火试过了还是没有!不过可以试试降落的 2011-12-18 14:37:23
你这应该是没有特异性扩增条带,建议考虑提高退火温度,或用降落PCR
2楼2011-12-17 22:59:23
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crush_bc

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这不是拖尾吧,这是p失败了,优化体系吧

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2011-12-17 23:49:21
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tttyyjj

铁杆木虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
wanhscn(应助指数-1): 无实际意义的应助回答! 2011-12-21 10:18:13
调整参数,重做吧
5楼2011-12-18 08:32:28
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