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hxy2011

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[交流] 核糖体结合位点与ATG起始密码子的距离问题

我最近目的基因连接一个表达载体，在细菌中表达，ATG起始位点离载体核糖体结合位点20bp左右，会不会影响我的目的基因的表达呢？

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1楼 2011-12-12 21:42:13

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longage.gene

银虫 (小有名气)

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西瓜(金币+2): Good! 2011-12-14 14:34:36

引用回帖:

8楼: Originally posted by hxy2011 at 2011-12-13 19:21:18:
非常感谢。原始质粒的RBS就是AGGAA，我在复制序列的时候出现了问题。第二个基因是里RBS比较远的酶切位点连接的。那像这种情况怎么解决呢？是不是要在设计引物时自己加RBS？

总之一个原则，atg前要RBS，spacer 5~10为佳，远些问题不大，短了问题很大。至于什么方法加RBS，具体问题具体分析，因为有很多方法。你的第一个基因RBS要再近点效率会提升不少。