应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DsRed为什么不发红色荧光？
51/1返回列表
查看: 1710  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

韩丽丽

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DsRed为什么不发红色荧光？ 已有4人参与

问题是这样的，我构建了一个载体，基本结构是pCMV-DsRed1-IVS-IRES-Hyg-SV40polyA,其中DsRed1是从pDsRed1-N1这个载体上用BamH1和Not1切下的包括kazaka序列和DsRed1基因的起始密码子和终止密码子的序列，下游的Hyg是潮霉素抗性基因，我本来希望能用IRES(核糖体结合位点)构建能同时表达两个基因的载体，但是转到细胞里发现红的只有聊聊几个，重复了很多次都是如此，我同时转染了pDsRed1-N1做为阳性对照，发红光的细胞很多很多，能达到80%，我不知道自己的问题出在哪里希望各位高人指点，先谢谢大家！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-07-19 09:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicknelson

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-07-19 17:34:49
外转基因的表达量首先取决于你的基因本身，可能你的基因本身在细胞内存在着严格的调控，不可能表达太多。其次才是启动子和转染效率。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-19 10:20:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

韩丽丽

新虫 (小有名气)
谢谢nicknelson的回复，当发现存在的问题后，我先后转了小鼠C2C12，PH-A,293三种细胞，都得到同样的结果，每次我都同时转染pDsRed1-N1做为阳性对照，三种细胞中红蛋白表达量都很高，应该可以排除细胞对该基因的表达排斥。我想问下会不会红蛋白有什么特性不适合这样的表达结构？
赞一下 回复此楼
3楼2010-07-19 17:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nanobio8816

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我是一新手，手头上有DsRed质粒，但不知为什么转染后用我们的显微镜观察不到，是我们的显微镜激发光不满足要求吗？请问楼主用的是什么牌子的显微镜，配的什么光源和滤光片啊
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-07-20 09:49:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gdzhaojiafu

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我想问这个问题楼上解决没有，我也遇到了类似问题！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
5楼2016-11-26 02:40:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 韩丽丽 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +9 翩翩一书生 2026-04-09 9/450 2026-04-10 11:43 by wp06
[考研] 298求调剂 +8 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 10/500 2026-04-10 11:25 by 高维春
[考研] 考研二轮调剂 +8 故人?? 2026-04-09 8/400 2026-04-10 09:44 by 青梅duoduo
[考研] 296求调剂 +6 汪！？！ 2026-04-09 6/300 2026-04-09 20:49 by lbsjt
[考研] 考研调剂 +13 冰冰，，， 2026-04-07 13/650 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[考研] 0860004 求调剂 309分 +6 Yin DY 2026-04-09 6/300 2026-04-09 10:19 by 啊李999
[考研] 331求调剂 +5 luoxin0706. 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:15 by zhouyuwinner
[考研] 266调剂 +8 daya sun 2026-04-07 9/450 2026-04-08 20:27 by yutian743
[考研] 土木水利专硕276分求调剂 +6 我想上学！！6 2026-04-05 9/450 2026-04-08 17:45 by 宋小宝HQ
[考研] 283求调剂 +19 A child 2026-04-04 19/950 2026-04-08 14:26 by xingguangj
[考研] 机械工程264学硕求调剂 +3 qiushangxian 2026-04-06 3/150 2026-04-08 01:53 by Linzejun
[考研] 344求调剂 +11 魏子per 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:01 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南科大生物学297分，求调剂推荐 +8 Y-yyusx 2026-04-06 9/450 2026-04-07 19:38 by biomichael
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
[考研] 一志愿武汉理工大学080200机械工程308分，求调剂 +4 终不似从前 2026-04-05 4/200 2026-04-06 11:46 by 考研学校招点人
[考研] 272求调剂 +4 电气李 2026-04-05 4/200 2026-04-05 10:41 by lbsjt
[考研] 材料化工306分找合适调剂 +14 沧海轻舟e 2026-04-04 14/700 2026-04-05 09:53 by 朱云虎202
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-04 4/200 2026-04-05 09:44 by zhq0425
[考研] 313求调剂 +3 海日海日 2026-04-04 3/150 2026-04-05 07:48 by 544594351
[考研] 考研调剂 +5 四川王涛 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:18 by 啵啵啵0119
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭