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tongxinkxy银虫 (小有名气)
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Sac II,EcoR I,Ssp I三酶切问题
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一环形质粒，红色为我的目的片段，要获得这个目的片段，设置了3个酶切位点（如果双酶切的话，目的基因和T载体酶切后电泳无法分开） 但是目前3个酶各自酶切均可以，但是3酶切或者任何两个酶双酶切均失败 原本计划为： 首先用Sac II, Ssp I双酶切得到2100和3400bp片段，预想获得3400bp片段后，胶回收再用 EcoR I 单酶切获得600和2800bp的目的片段，但是首先双酶切就没有成功 Sac II, Ssp I双酶切体系为 ： 酶各1 T缓冲液 2 BSA 2 质粒 0.6ug 加水到20 （TAKARA的） 如果说单酶切一次一次切的话，胶回收的浓度不够下次及下下次酶切浓度，是否有好的浓缩DNA的方法？  |
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2楼2011-11-28 13:32:56
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