| 查看: 3008 | 回复: 25 | ||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||
[求助]
有关蛋白表达的问题
|
||
| 我的目的基因片段只有200bp左右，现在连接到Pcdf-dute和pet-32a，每个都转到BL-21和Rosste中，诱导过后，sds-page检测，可是却不表达，诱导条件试过37度、25度、20度、18度和16度，IPTG浓度0.8mm、1mm和1.2mm，培养基试过LB、TB还有一个高浓度培养基，都没有表达，现在郁闷死了，无计可施了，各位大侠帮帮忙。 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有266人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 目的蛋白表达的问题
已经有20人回复
- 关于蛋白表达的问题
已经有3人回复
- 膜蛋白表达问题
已经有15人回复
- 问一下蛋白表达中出现的问题~
已经有7人回复
- 做蛋白体外表达时的引物设计问题！
已经有12人回复
- 关于蛋白重组表达的问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】酵母表达可溶性蛋白问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】蛋白酶表达问题，求蛋白表达系统
已经有4人回复
- 【求助/交流】关于绿色荧光蛋白表达问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】关于PEt-28a质粒载体表达蛋白质的问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】急！急！急！ his标签表达的蛋白出问题了，求指导！！！
已经有7人回复
- 【求助/交流】基因工程菌诱导蛋白表达的问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】关于大肠杆菌中蛋白表达的问题
已经有9人回复
2楼2011-11-20 21:16:06
blackrose8089
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 16
- 应助: 100 (初中生)
- 贵宾: 0.11
- 金币: 10643.1
- 散金: 155
- 红花: 30
- 沙发: 6
- 帖子: 3706
- 在线: 792小时
- 虫号: 614948
- 注册: 2008-09-28
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
3楼2011-11-20 21:32:12
4楼2011-11-20 23:12:00
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zibeisha(金币+3): 2011-11-21 08:41:06
wanhscn(金币+5): 热心的认真的回答！ 2011-11-21 09:01:35
西瓜(金币+2, MolEPI+1): Good！ 2011-11-22 18:09:41
zibeisha(金币+3): 2011-11-21 08:41:06
wanhscn(金币+5): 热心的认真的回答！ 2011-11-21 09:01:35
西瓜(金币+2, MolEPI+1): Good！ 2011-11-22 18:09:41
| 蛋白原核表达本来就是个难题 你在这就寥寥几句 谁也帮不上忙 回话的都是只懂一二的 蛋白原核表达 单从表不表达上来说 主要要注意 蛋白的性质 这个是最主要的 有的蛋白是疏水性极强的 有的蛋白是毒性的 有的蛋白等等 如果相关载体 菌株 都试过了 那只能放弃这个系统了 温度 诱导浓度什么的 那只是针对表达质量而言 你现在都没表达出来 所以先确定到底有没有表达 确定载体构建是否百分百正确 然后确定蛋白真的是没表达 还是你没检测到 因为从KB数上看 你的蛋白很小 所以注意系统 可以用western检测一下 如果有表达 只是量小 那么好 再继续这个问题 |
5楼2011-11-21 02:42:51
6楼2011-11-21 08:38:28
xiaoshidemei
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3036.1
- 红花: 1
- 帖子: 334
- 在线: 73.3小时
- 虫号: 1400353
- 注册: 2011-09-13
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
7楼2011-11-21 09:58:37
gjs713
至尊木虫 (职业作家)
- MolEPI: 1
- 应助: 168 (高中生)
- 金币: 16732.5
- 散金: 138
- 红花: 16
- 沙发: 6
- 帖子: 3951
- 在线: 1048.1小时
- 虫号: 608364
- 注册: 2008-09-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
8楼2011-11-21 10:22:11
冰泉cathy
木虫 (小有名气)
- MolEPI: 1
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1457.3
- 散金: 20
- 帖子: 198
- 在线: 106.2小时
- 虫号: 1394210
- 注册: 2011-09-07
- 专业: 生物大分子结构与功能
9楼2011-11-21 12:48:10
【答案】应助回帖
★
西瓜(金币+1): 辛苦 2011-11-22 18:10:20
西瓜(金币+1): 辛苦 2011-11-22 18:10:20
|
好吧 得早说嘛 膜蛋白 膜蛋白表达 呵呵 看运气了 不能说太多了 http://wolfson.huji.ac.il/wolfson.html 上这学习一下 实在不行就只能另换系统了 酵母的 体外的 等等 |
10楼2011-11-21 15:17:58
