应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » ELISA中抗体稀释问题求教
91/1返回列表
查看: 2903  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

饼哥

木虫 (正式写手)

[交流] ELISA中抗体稀释问题求教

虫友们，我最近在做间接ELISA，想问一下大家在做这个实验时都用什么去稀释一抗和二抗？我自己用的是0.01MPBS，但感觉效果不是很好。虫友们说说自己的情况呗。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

ELISA 金、磁珠与抗体的结合

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-11-17 19:20:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dongjie1209

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
饼哥(金币+1): 嗯，我决定再试几次，摸索一下条件 2011-11-18 09:22:08
我也用的PBS，挺好的啊。估计是一抗浓度还没有弄清楚~倍比稀释，找到一抗和样品结合的最佳比例

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-11-17 23:19:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小猪0452

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
饼哥(金币+1): 我用了几种，做个对比，呵呵！ 2011-11-20 12:54:41
PBSTB：0.05% TWEEN-20 ，1%BSA
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-11-19 16:30:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vetzhang

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
一般来讲PBST做稀释液的效果要好于PBS，因为T即吐温20（0.05%-0.1%）0.05%常用，作为洗液和血清及二抗稀释液的缓冲液可以消除非特异性反应。
另外为降低非特异性反应，常用一抗稀释液为PBST中加如下物质：
1. 1%-3%的BSA（1%BSA常用）
2. 2%-5%脱脂乳（5%脱脂乳常用）
3. 0.25-%2%的明胶（猪源/牛源/鱼源明胶皆可，检测猪源血清最好不要用猪源明胶，常用浓度1%）
4. 其他常用非特异性反应保护剂还有如0.5%PVA、 1%酪蛋白、5%-10%马血清等。
二抗稀释液可以和一抗稀释液相同或直接用PBST即可。
其他还有很多配方，望多加摸索，你可以看看ELISA 手册在网上搜搜挺多的。有什么问题还可以在交流。
赞一下(4人) 回复此楼
4楼2012-02-18 15:38:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朱伟英

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看看免疫书上介绍很详细的
赞一下 回复此楼
5楼2012-05-10 20:54:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

饼哥

木虫 (正式写手)
引用回帖:
172780楼: Originally posted by 朱伟英 at 2012-05-10 20:54:43:
看看免疫书上介绍很详细的

去年的问题，早解决了，呵呵！
赞一下 回复此楼
6楼2012-05-10 21:32:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xifang8231

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
172785楼: Originally posted by 饼哥 at 2012-05-10 21:32:51
去年的问题，早解决了，呵呵！...

可否分享一下，问题是怎么解决的吗，过程中有什么需要注意的吗？或者有什么小技巧吗。O(∩_∩)O谢谢
赞一下 回复此楼
7楼2012-05-29 16:10:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

饼哥

木虫 (正式写手)
引用回帖:
173922楼: Originally posted by xifang8231 at 2012-05-29 16:10:03
可否分享一下，问题是怎么解决的吗，过程中有什么需要注意的吗？或者有什么小技巧吗。O(∩_∩)O谢谢...

我直接用pH7.4的0.01MPBS稀释的，我的一抗是多抗，现场采的患病羊血清。效果不错，文章已经投出去了。
赞一下 回复此楼
8楼2012-05-30 13:58:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐至上0220

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
173973楼: Originally posted by 饼哥 at 2012-05-30 13:58:53
我直接用pH7.4的0.01MPBS稀释的，我的一抗是多抗，现场采的患病羊血清。效果不错，文章已经投出去了。...

请问你的血清中添加量是多少？
赞一下 回复此楼
9楼2013-01-09 16:20:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 饼哥 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭