24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

饼哥

木虫 (正式写手)

BioEPI: 1
应助: 2 (幼儿园)
金币: 5019
帖子: 414
在线: 263小时
虫号: 1102586

[交流] ELISA中抗体稀释问题求教

虫友们，我最近在做间接ELISA，想问一下大家在做这个实验时都用什么去稀释一抗和二抗？我自己用的是0.01MPBS，但感觉效果不是很好。虫友们说说自己的情况呗。

回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

ELISA

金、磁珠与抗体的结合

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2011-11-17 19:20:19

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

vetzhang

金虫 (小有名气)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 660.1
帖子: 273
在线: 426.2小时
虫号: 1442774

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

一般来讲PBST做稀释液的效果要好于PBS，因为T即吐温20（0.05%-0.1%）0.05%常用，作为洗液和血清及二抗稀释液的缓冲液可以消除非特异性反应。
另外为降低非特异性反应，常用一抗稀释液为PBST中加如下物质：
1. 1%-3%的BSA（1%BSA常用）
2. 2%-5%脱脂乳（5%脱脂乳常用）
3. 0.25-%2%的明胶（猪源/牛源/鱼源明胶皆可，检测猪源血清最好不要用猪源明胶，常用浓度1%）
4. 其他常用非特异性反应保护剂还有如0.5%PVA、 1%酪蛋白、5%-10%马血清等。
二抗稀释液可以和一抗稀释液相同或直接用PBST即可。
其他还有很多配方，望多加摸索，你可以看看ELISA 手册在网上搜搜挺多的。有什么问题还可以在交流。