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[交流]
ELISA中抗体稀释问题求教
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| 虫友们，我最近在做间接ELISA，想问一下大家在做这个实验时都用什么去稀释一抗和二抗？我自己用的是0.01MPBS，但感觉效果不是很好。虫友们说说自己的情况呗。 |
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 ELISA | 金、磁珠与抗体的结合 |
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5楼2012-05-10 20:54:43
2楼2011-11-17 23:19:29
3楼2011-11-19 16:30:44
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
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一般来讲PBST做稀释液的效果要好于PBS，因为T即吐温20（0.05%-0.1%）0.05%常用，作为洗液和血清及二抗稀释液的缓冲液可以消除非特异性反应。 另外为降低非特异性反应，常用一抗稀释液为PBST中加如下物质： 1. 1%-3%的BSA（1%BSA常用） 2. 2%-5%脱脂乳（5%脱脂乳常用） 3. 0.25-%2%的明胶（猪源/牛源/鱼源明胶皆可，检测猪源血清最好不要用猪源明胶，常用浓度1%） 4. 其他常用非特异性反应保护剂还有如0.5%PVA、 1%酪蛋白、5%-10%马血清等。 二抗稀释液可以和一抗稀释液相同或直接用PBST即可。 其他还有很多配方，望多加摸索，你可以看看ELISA 手册在网上搜搜挺多的。有什么问题还可以在交流。 |
4楼2012-02-18 15:38:12
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