24小时热门版块排行榜    

查看: 2552  |  回复: 13

04090023

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】竞争性ELISA 竞争孔比稀释孔OD值高 已有2人参与

待检测物质是小分子半抗原,将其与KLH、OVA等大分子载体蛋白偶联后制备免疫抗原。之后制备单克隆抗体,但是最近在检测抗体特异性的过程中遇到困难。用竞争性ELISA方法,将小分子抗原与抗体孵育后检测其OD值,同时做抗体相同稀释倍数的对照,结果发现竞争性的孔OD值居然比对照还高!!真悲剧,实在是想不通,求各位大侠指点啊!!!

求助求助!!!

PS:同时做阴性孔和空白对照孔,OD值都在0.09以下,ELISA体系应该没有问题吧~~~~
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gydgs033

金虫 (小有名气)


amisking(金币+1): 2010-03-28 14:36
04090023(金币+5): 2010-03-30 14:34
你做竞争法为何阴性对照OD在0.09一下??,至少要2.0以上吧!
2楼2010-03-28 10:25:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gydgs033

金虫 (小有名气)

请问竞争OD和对照OD具体是多少??
3楼2010-03-28 10:29:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

04090023

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 04090023 at 2010-03-24 22:10:42:
待检测物质是小分子半抗原,将其与KLH、OVA等大分子载体蛋白偶联后制备免疫抗原。之后制备单克隆抗体,但是最近在检测抗体特异性的过程中遇到困难。用竞争性ELISA方法,将小分子抗原与抗体孵育后检测其OD值,同时 ...

哦,我指的是空白孔在0.09以下。不好意思。对照样的话,不同浓度的孔,差别不一样,我现在想不明白为什么加了抗原的竞争孔,比不加抗原的对照孔OD值还高呢?
4楼2010-03-30 14:29:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

04090023

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gydgs033 at 2010-03-28 10:25:17:
你做竞争法为何阴性对照OD在0.09一下??,至少要2.0以上吧!

不好意思啊,我不太会用小木虫的。竞争孔和对照孔的差值大概差值在0.3这样子。希望您能指点!!
5楼2010-03-30 14:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gydgs033

金虫 (小有名气)

你指得竞争法是不是将偶联的半抗原用1*CB PH=9。6 稀释到合适的浓度  4度过夜包被在96孔板上,甩干,然后加封闭液 37度封闭2小时 甩干。再将将小分子抗原与抗体孵育后加入板孔检测其OD值,同时做抗体相同稀释倍数的对照??是这样吗??
6楼2010-04-25 11:33:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Annel

金虫 (小有名气)

你的竞争抗原是用什么溶解的?对照孔用的什么?
7楼2010-04-26 11:07:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Annel

金虫 (小有名气)

我做竞争也是很不稳定,竞争孔跟对照孔相差不大,有时候竞争孔还比对照孔大,竞争性很不好,我怀疑我的产生了桥抗体
8楼2010-04-26 11:09:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiudan1225

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
请问楼主,竞争孔OD值比非竞争孔的OD值大的问题解决了吗?我在检测培氟沙星的过程中也遇到了此类问题,实在是太纠结了。。。
9楼2012-03-02 10:37:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yougking

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
19928588楼: Originally posted by xiudan1225 at 2012-03-02 10:37:50
请问楼主,竞争孔OD值比非竞争孔的OD值大的问题解决了吗?我在检测培氟沙星的过程中也遇到了此类问题,实在是太纠结了。。。

同求,竞争孔OD值比非竞争控OD值大的问题,我在检测一种抗生素的时候遇到了同样的问题,怀疑是不是高小分子浓度导致的,另外小分子稀释液内含有(<0.1%DMSO)
10楼2012-10-10 06:48:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 04090023 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +4 Mqqqqqq 2026-03-19 4/200 2026-03-20 14:15 by 星空星月
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+3 babangida 2026-03-19 7/350 2026-03-20 14:13 by hejicker
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 6/300 2026-03-19 17:18 by fei626-918
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +8 zlingli 2026-03-13 8/400 2026-03-19 16:32 by 轻松不少随
[考研] 一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂 +5 枫桥ZL 2026-03-18 7/350 2026-03-19 14:52 by 功夫疯狂
[考研] 287求调剂 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-19 12:32 by peike
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +7 小材化本科 2026-03-18 7/350 2026-03-19 10:46 by Linda Hu
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +10 Liwangman 2026-03-15 10/500 2026-03-19 10:25 by 无际的草原
[考研] 085600材料与化工 +5 安全上岸! 2026-03-16 5/250 2026-03-18 15:33 by cmz0325
[考研] 311求调剂 +6 26研0 2026-03-15 6/300 2026-03-18 14:43 by haxia
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 中科院材料273求调剂 +4 yzydy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 15:59 by Gaodh_82
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 招收0805(材料)调剂 +3 18595523086 2026-03-13 3/150 2026-03-14 00:33 by 123%、
信息提示
请填处理意见