24小时热门版块排行榜    

查看: 3042  |  回复: 13

04090023

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】竞争性ELISA 竞争孔比稀释孔OD值高 已有2人参与

待检测物质是小分子半抗原,将其与KLH、OVA等大分子载体蛋白偶联后制备免疫抗原。之后制备单克隆抗体,但是最近在检测抗体特异性的过程中遇到困难。用竞争性ELISA方法,将小分子抗原与抗体孵育后检测其OD值,同时做抗体相同稀释倍数的对照,结果发现竞争性的孔OD值居然比对照还高!!真悲剧,实在是想不通,求各位大侠指点啊!!!

求助求助!!!

PS:同时做阴性孔和空白对照孔,OD值都在0.09以下,ELISA体系应该没有问题吧~~~~
回复此楼

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gydgs033

金虫 (小有名气)


amisking(金币+1): 2010-03-28 14:36
04090023(金币+5): 2010-03-30 14:34
你做竞争法为何阴性对照OD在0.09一下??,至少要2.0以上吧!
2楼2010-03-28 10:25:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gydgs033

金虫 (小有名气)

请问竞争OD和对照OD具体是多少??
3楼2010-03-28 10:29:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

04090023

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 04090023 at 2010-03-24 22:10:42:
待检测物质是小分子半抗原,将其与KLH、OVA等大分子载体蛋白偶联后制备免疫抗原。之后制备单克隆抗体,但是最近在检测抗体特异性的过程中遇到困难。用竞争性ELISA方法,将小分子抗原与抗体孵育后检测其OD值,同时 ...

哦,我指的是空白孔在0.09以下。不好意思。对照样的话,不同浓度的孔,差别不一样,我现在想不明白为什么加了抗原的竞争孔,比不加抗原的对照孔OD值还高呢?
4楼2010-03-30 14:29:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

04090023

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gydgs033 at 2010-03-28 10:25:17:
你做竞争法为何阴性对照OD在0.09一下??,至少要2.0以上吧!

不好意思啊,我不太会用小木虫的。竞争孔和对照孔的差值大概差值在0.3这样子。希望您能指点!!
5楼2010-03-30 14:33:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gydgs033

金虫 (小有名气)

你指得竞争法是不是将偶联的半抗原用1*CB PH=9。6 稀释到合适的浓度  4度过夜包被在96孔板上,甩干,然后加封闭液 37度封闭2小时 甩干。再将将小分子抗原与抗体孵育后加入板孔检测其OD值,同时做抗体相同稀释倍数的对照??是这样吗??
6楼2010-04-25 11:33:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Annel

金虫 (小有名气)

你的竞争抗原是用什么溶解的?对照孔用的什么?
7楼2010-04-26 11:07:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Annel

金虫 (小有名气)

我做竞争也是很不稳定,竞争孔跟对照孔相差不大,有时候竞争孔还比对照孔大,竞争性很不好,我怀疑我的产生了桥抗体
8楼2010-04-26 11:09:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiudan1225

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
请问楼主,竞争孔OD值比非竞争孔的OD值大的问题解决了吗?我在检测培氟沙星的过程中也遇到了此类问题,实在是太纠结了。。。
9楼2012-03-02 10:37:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yougking

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
19928588楼: Originally posted by xiudan1225 at 2012-03-02 10:37:50
请问楼主,竞争孔OD值比非竞争孔的OD值大的问题解决了吗?我在检测培氟沙星的过程中也遇到了此类问题,实在是太纠结了。。。

同求,竞争孔OD值比非竞争控OD值大的问题,我在检测一种抗生素的时候遇到了同样的问题,怀疑是不是高小分子浓度导致的,另外小分子稀释液内含有(<0.1%DMSO)
10楼2012-10-10 06:48:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 04090023 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +37 医学老男孩 2026-08-13 87/4350 2026-08-18 06:35 by 医学老男孩
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见