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04090023

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】竞争性ELISA 竞争孔比稀释孔OD值高 已有2人参与

待检测物质是小分子半抗原,将其与KLH、OVA等大分子载体蛋白偶联后制备免疫抗原。之后制备单克隆抗体,但是最近在检测抗体特异性的过程中遇到困难。用竞争性ELISA方法,将小分子抗原与抗体孵育后检测其OD值,同时做抗体相同稀释倍数的对照,结果发现竞争性的孔OD值居然比对照还高!!真悲剧,实在是想不通,求各位大侠指点啊!!!

求助求助!!!

PS:同时做阴性孔和空白对照孔,OD值都在0.09以下,ELISA体系应该没有问题吧~~~~
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Annel

金虫 (小有名气)

你的竞争抗原是用什么溶解的?对照孔用的什么?
7楼2010-04-26 11:07:47
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Annel

金虫 (小有名气)

我做竞争也是很不稳定,竞争孔跟对照孔相差不大,有时候竞争孔还比对照孔大,竞争性很不好,我怀疑我的产生了桥抗体
8楼2010-04-26 11:09:28
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