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【求助/交流】竞争性ELISA 竞争孔比稀释孔OD值高
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04090023
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专业: 食品科学与工程
[交流]
【求助/交流】竞争性ELISA 竞争孔比稀释孔OD值高
已有2人参与
待检测物质是小分子半抗原,将其与KLH、OVA等大分子载体蛋白偶联后制备免疫抗原。之后制备单克隆抗体,但是最近在检测抗体特异性的过程中遇到困难。用竞争性ELISA方法,将小分子抗原与抗体孵育后检测其OD值,同时做抗体相同稀释倍数的对照,结果发现竞争性的孔OD值居然比对照还高!!真悲剧,实在是想不通,求各位大侠指点啊!!!
求助求助!!!
PS:同时做阴性孔和空白对照孔,OD值都在0.09以下,ELISA体系应该没有问题吧~~~~
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1楼
2010-03-24 22:10:42
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xiudan1225
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专业: 生化分析及生物传感
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
请问楼主,竞争孔OD值比非竞争孔的OD值大的问题解决了吗?我在检测培氟沙星的过程中也遇到了此类问题,实在是太纠结了。。。
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9楼
2012-03-02 10:37:50
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gydgs033
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★
amisking(金币+1): 2010-03-28 14:36
04090023(金币+5): 2010-03-30 14:34
你做竞争法为何阴性对照OD在0.09一下??,至少要2.0以上吧!
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2楼
2010-03-28 10:25:17
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gydgs033
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请问竞争OD和对照OD具体是多少??
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3楼
2010-03-28 10:29:59
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04090023
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Originally posted by
04090023
at 2010-03-24 22:10:42:
待检测物质是小分子半抗原,将其与KLH、OVA等大分子载体蛋白偶联后制备免疫抗原。之后制备单克隆抗体,但是最近在检测抗体特异性的过程中遇到困难。用竞争性ELISA方法,将小分子抗原与抗体孵育后检测其OD值,同时 ...
哦,我指的是空白孔在0.09以下。不好意思。对照样的话,不同浓度的孔,差别不一样,我现在想不明白为什么加了抗原的竞争孔,比不加抗原的对照孔OD值还高呢?
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4楼
2010-03-30 14:29:32
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