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紧急求助:关于PCR过程中出现弥散的问题。双歧杆菌。。。。。。。。。。。。。。。
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wwsw38
铁虫
(小有名气)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 4.5
帖子: 85
在线: 66.7小时
虫号: 943642
注册: 2010-01-16
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学
[
求助
]
紧急求助:关于PCR过程中出现弥散的问题。双歧杆菌。。。。。。。。。。。。。。。
描述:我用引物(BIF1)扩增总细菌中的双歧杆菌。但是在扩增过程中:
1、只有最边上的两个条带比较明亮,其它的非常非常弱,并且还有弥散,见图.
2、做55-65度的温度梯度之后,仍然是这两条亮,其它的弱和弥散。
3、把模板从1微升增加到5微升后,两条亮带仍然很亮,而其它的仍然很弱,并且更加弥散了。
4、可以排除试剂和引物的问题,也可以排除PCR程序的问题。所以我怀疑是DNA模板降解了?但是用这个DNA扩其它细菌都非常顺利啊。
所以:请各位虫虫帮在下分析一下,我要怎么做才能把那些暗的带扩增成边上那两条带那么亮?
图
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为自己加油
1楼
2011-11-08 17:24:42
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imyting
至尊木虫
(正式写手)
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(初中生)
金币: 10216.2
散金: 658
红花: 5
帖子: 805
在线: 167.6小时
虫号: 736362
注册: 2009-03-31
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
你说的不太清楚啊!你两边的和中间的有区别吗?
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一下
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悠哉游哉做实验,成兮败兮我随便
4楼
2011-11-12 09:28:49
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