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叮叮0504

新虫 (初入文坛)

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[求助] 【求助/交流】表达载体pCAMBIA1304表达顺序看不懂

怎么有2个35S启动子啊，一个方向向左，一个方向向右，我在多克隆位点上插入了我的目的基因，报告基因GFP和GUS还会表达么，新人在线等，急啊，如果发帖不规范，版主大人大量

1304质粒图

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1楼 2011-11-03 20:11:33

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荒寒落寞

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

6楼: Originally posted by lixg at 2011-11-09 08:32:13:
1.先搞清楚“GFP表达”是什么意思！转录和翻译都可叫做表达。
2.是的，应该将基因插入Nco和SpeI之间。其二，必须将你的基因的ORF与GFP构建成融合蛋白，GFP才能发光。
3.否则（发生移码），即使GFP能够转录，GF ...

额，还是不明白啊，GFP是荧光蛋白，虽然我知道只有构建目的蛋白和GFP融合蛋白才能定位，但是如果我把目的基因插入到NCO和SPE之间，GFP和GUS还会检测到么，不会移码吧，GFP自带起始密码子ATG