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shuifen1108

金虫 (正式写手)

[求助] PCR产物回收之后跑胶浓度过低

PCR之后,切胶,用Takara回收胶试剂盒回收的,结果跑胶之后发现浓度很低,请教各位大侠,能不能用于下一步的PCR?切还有就是回收产率低的原因有哪些?完胶之后放入-20度保存一段时间再回收,会对回收产率有影响吗?注明所用的marker DL2000,4ul,样品每个3ul。





[ Last edited by shuifen1108 on 2011-11-2 at 20:09 ]
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Constig

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

shuifen1108(金币+2): 2011-11-03 11:24:14
引用回帖:
5楼: Originally posted by shuifen1108 at 2011-11-02 22:35:17:
按照说明书一步步来的,而且第一步溶解胶的时候还特别小心,加热了15min左右才开始往下做的,所以胶肯定完全溶解了,下面都很简单,以前没出现过这种情况,会不会试剂盒有问题,买了好久了。3Q

溶胶的时间太长会对DNA片段有损伤的,另外回收试剂盒的损失率都会很高。不过如果只是用来PCR的话,完全没有问题的。
让我们用微笑面对苦难吧
7楼2011-11-03 09:51:52
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

2楼2011-11-02 21:22:40
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wcwluwei

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): 鼓励新虫多发贴!鼓励多来分子生物版!有奖励! 2011-11-02 21:24:55
wanhscn(金币+1): 鼓励应助! 2011-11-02 21:25:03
shuifen1108(金币+2): 2011-11-03 11:23:51
本帖内容被屏蔽

3楼2011-11-02 21:24:03
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

仔细看看试剂盒的说明书,上面会有详细的问题说明。Takara家的说明书编得还是不错滴

[ Last edited by 西瓜 on 2011-11-2 at 21:44 ]
4楼2011-11-02 21:39:53
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