24小时热门版块排行榜    

查看: 1154  |  回复: 3

anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)

[求助] 用离子交换法纯化蛋白如何选定缓冲液?

一种小肽,是用毕赤酵母表达得到的,pI为11,一般呈阳离子状态,用离子交换法纯化,理论上一般用阳离子交换法分离纯化,但是该选用什么样的缓冲液呢(主要是pH该选多少)?还有一种说法是用阴离子交换法纯化,以除去杂蛋白,进而使目的蛋白得到纯化(这种方法在理论上是可行的,但貌似费时,费力)。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

爱拼才会赢
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jacobgo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流! 2011-10-28 19:26:51
可以用CEC,pH需筛选优化了,主要同时考试目标纯度和回收率;
也可以用AEC,主要以流穿模式做。
路遥远,我们一起走
2楼2011-10-28 12:02:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sspxiaoji

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励发帖交流! 2011-10-28 19:26:58
用阳离子交换柱,可以考虑pH6.0-7.0的缓冲液,因为大部分蛋白质的等电点在这附近,带电荷少,这样容易穿透除去其他杂蛋白。而你的目的蛋白PI在11,挂柱应该比较牢固。但是有个问题需要注意,PH离你的目标蛋白PI太远,有可能导致挂柱后难以洗脱。
3楼2011-10-28 12:21:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流! 2011-10-28 19:27:04
理论上来说,所用缓冲液的PH和你的目的蛋白的等电点差一个PH单位,从你的目的蛋白来看,PH挺高的,考虑你的填料能不能适应。
4楼2011-10-28 13:03:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 anyaxiong 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程321分求调剂 +9 大米饭! 2026-03-15 12/600 2026-03-16 21:59 by 大米饭!
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +3 张vvvv 2026-03-15 5/250 2026-03-16 20:25 by 张vvvv
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +8 一鸭鸭哟 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:35 by 沐霖12138
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[硕博家园] 深圳大学硕士招生(2026秋,传感器方向,仅录取第一志愿) +4 xujiaoszu 2026-03-11 8/400 2026-03-16 09:45 by xujiaoszu
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 271求调剂 +10 生如夏花… 2026-03-11 10/500 2026-03-14 00:35 by 卖报员小雨
[考研] 311求调剂 +5 牛乳糖的卡卡 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:05 by JourneyLucky
[考研] 0703,333分求调剂 一志愿郑州大学-物理化学 +3 李魔女斗篷 2026-03-11 3/150 2026-03-13 22:24 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工求调剂一志愿 985 总分 295 +8 dream…… 2026-03-12 8/400 2026-03-13 22:17 by 星空星月
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +5 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:40 by JourneyLucky
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
信息提示
请填处理意见