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54maozhu

铜虫 (初入文坛)

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[求助] DNA电泳样品都留在孔内

求助高手，PCR产物电泳样品都留在孔内，没有条带。1.5%琼脂糖，1乘的TAE。PCR产物理论长度160bp。
为便于交流，以图片形式直接上传！

[ Last edited by wanhscn on 2011-10-27 at 10:39 ]

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1楼 2011-10-27 10:07:46

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另一个天堂

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2011-10-27 20:46:56

首先，你跑了多长时间，电压多大？
如果都没问题，那就是你的PCR产物的问题。还有留在孔洋的不一定是PCR产物

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4楼2011-10-27 11:50:58

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考研生涯

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【答案】应助回帖

会不会是琼脂糖浓度太高，一般就是0.8—1左右吧

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2楼2011-10-27 11:11:21

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illcf_11

银虫 (初入文坛)

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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2011-10-27 20:46:50
54maozhu(金币+6): 2011-11-03 16:50:10

感觉像是PCR没有进行过，目的片段160bp，琼脂糖1.5%是没有问题的。另外，如果你还有样品，建议你是不是再跑一次，但在跑开1cm的样子就提早拍个照看看。本人出现过，跑的短条带在，跑开了，条带失踪的情况

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3楼2011-10-27 11:19:00

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yu19841

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【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2011-10-27 20:47:02

估计是在胶制好后，拔梳子的时候把胶孔处弄破了
你的PCR产物全部掉到点样处，所有没在胶上跑出来。

1.5%-2%的胶最容易拔破了

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5楼2011-10-27 12:36:00

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