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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】电泳孔亮
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wzhyxh

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】电泳孔亮 已有6人参与

琼脂糖凝胶电泳时，mark，阳性对照，阴性对照都是正常的 但是样品的条带的上样孔很亮，而且目的条带也变淡了很多  是怎么回事啊？
由于RNA模板放-70存放了2个多月，然后进行反转录和pcr,以前刚提的时候跑电泳孔不会亮，会不会是RNA降解了啊？谢谢大侠支教啊
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1楼 2011-03-15 12:49:44
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-03-15 19:36:32
有这个可能，如果不影响实验的话就无所谓了，可以以第一的产物为模板再扩增一次，这样条带就会亮点
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风雪夜归人
2楼2011-03-15 12:59:38
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feng__

金虫 (著名写手)

雾~蝶
杂蛋白吧
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会不会偶尔也会想起我....
3楼2011-03-15 13:19:32
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wzhyxh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by wqj1988926 at 2011-03-15 12:59:38:
有这个可能，如果不影响实验的话就无所谓了，可以以第一的产物为模板再扩增一次，这样条带就会亮点

恩 我正在做这一步 哈哈
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4楼2011-03-17 14:39:58
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wzhyxh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by feng__ at 2011-03-15 13:19:32:
杂蛋白吧

以前跑的时候都没有的，离心后跑电泳还是很亮 怎么突然就有杂蛋白了呢
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5楼2011-03-17 14:41:44
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sxq大嘴

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wzhyxh at 2011-03-15 12:49:44:
琼脂糖凝胶电泳时，mark，阳性对照，阴性对照都是正常的 但是样品的条带的上样孔很亮，而且目的条带也变淡了很多  是怎么回事啊？
由于RNA模板放-70存放了2个多月，然后进行反转录和pcr,以前刚提的时候跑电泳孔不 ...

主要是RNA降解了，我也遇到过类似问题，可以重提RNA ，也可以用第一轮PCR产物在进行PCR
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6楼2011-03-17 15:39:56
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
蛋白污染或者EB没冲干净
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7楼2011-03-19 20:24:09
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wzhyxh

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by sxq大嘴 at 2011-03-17 15:39:56:
主要是RNA降解了，我也遇到过类似问题，可以重提RNA ，也可以用第一轮PCR产物在进行PCR

恩  2p的时候孔就不亮了
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8楼2011-03-22 14:20:13
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另一个天堂

金虫 (小有名气)
如果点样过程没有问题的话，应该是RNA的问题，是不是提纯不干净
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9楼2011-03-27 19:21:06
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