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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 果胶酶活力测定
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raaishenghuo

铁杆木虫 (小有名气)

[求助] 果胶酶活力测定

用DNS法测定果胶酶活力是哪个半乳糖醛酸的什么基团与DNS反应？谁能给出具体的反应式？
如果存在醛基，还有葡萄糖，是不是会影响DNS法测定果胶酶活力？那有什么方法去除醛基和葡萄糖的影响呢？
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fighting!
1楼 2011-10-11 18:50:58
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asznpb

木虫 (正式写手)

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★ ★ ★ ★
adslye(金币+4): 鼓励交流~ 2011-10-14 19:34:26
　DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下，二硝基水杨酸（DNS）与还原糖发生氧化还原反应，生成3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色，且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理，用比色法测定还原糖含量的。因其显色的深浅只与糖类游离出还原基团的数量有关，而对还原糖的种类没有选择性，故DNS方法适合用在多糖（如纤维素、半纤维素和淀粉等）水解产生的多种还原糖体系中。
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6楼2011-10-13 13:18:30
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2011-10-11 21:53:47
果胶酶是很多单酶的复合体。DNS法只能测定综合果胶酶酶活。酶活测定分析方法需要和你的实验目的联系起来。你对果胶酶了解的太少了。
给你一篇中文的文章先看看吧，2002年的，其实像测酶活这类很老的技术性文章中文的就足够了
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2楼2011-10-11 19:27:19
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流~ 2011-10-14 19:34:33
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7楼: Originally posted by raaishenghuo at 2011-10-13 21:42:06:
谢谢你的回复。不过我是想问机理的方程式，半乳糖醛基与DNS显色反应，半乳糖醛酸的哪个基团与DNS反应，怎么反应，因为有其它干扰物质存在，我想看看怎么去除干扰物质的影响。
我是想问改性纤维素上的醛基能不能 ...

必然是醛基啊，你要是想看那个电子去攻击那个电子取代那个电子轨道什么的，你就自己翻有机化学去吧，那玩意大一学的，早忘记了，纤维素的还原端的确和DNS能反应，但是相对于纤维素的高聚合性而言，几乎可以忽略不计了……
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8楼2011-10-13 22:53:40
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asznpb

木虫 (正式写手)

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9楼: Originally posted by raaishenghuo at 2011-10-14 18:19:06:
把纤维素氧化了，C2和C3断裂，生成双醛纤维素，这个醛基能与DNS反应么？

纤维素是线性葡萄糖的高聚物，残基间通过β（1-4）糖苷键连接的纤维二糖可以看成是他的二糖单位。显然你不大明白纤维素这个名词代表的是什么概念，高聚物究竟聚合程度有多高，你能把纤维素中葡萄糖残基的C2和C3断裂了的意义有多大……
ps：王镜岩生化上册p45有专门的纤维素介绍，，其实我实在搞不清你如何能使C2和C3断裂，断裂后那还是纤维素么？如果你能成功的将纤维素中所有葡萄糖残基的C2和C3完全断裂，如果成本足够低，效率足够高的话，你将开启生物能源从实验室到汽车油箱之路的大门……
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10楼2011-10-14 19:45:00
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流~ 2011-10-14 19:34:13
引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-10-11 19:27:19:
果胶酶是很多单酶的复合体。DNS法只能测定综合果胶酶酶活。酶活测定分析方法需要和你的实验目的联系起来。你对果胶酶了解的太少了。
给你一篇中文的文章先看看吧，2002年的，其实像测酶活这类很老的技术性文章中 ...

详见附件，多看看文献，不要什么问题都跑上来问，小木虫也不是万能的，别人的答案不一定是正确的，你自己根据自己的实验看文献收获更大！
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3楼2011-10-11 19:28:52
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raaishenghuo

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引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-10-11 19:27:19:
果胶酶是很多单酶的复合体。DNS法只能测定综合果胶酶酶活。酶活测定分析方法需要和你的实验目的联系起来。你对果胶酶了解的太少了。
给你一篇中文的文章先看看吧，2002年的，其实像测酶活这类很老的技术性文章中 ...

谢谢你的回答。这种类似的文章我读过。不过我没有查到DNS显色反应的机理和具体反应方程式，请赐教。还有就是改性纤维素链上的醛基会对DNS法造成影响么？
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fighting!
4楼2011-10-13 12:42:24
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
adslye(金币+4): 鼓励交流~ 2011-10-14 19:34:20
引用回帖:
4楼: Originally posted by raaishenghuo at 2011-10-13 12:42:24:
谢谢你的回答。这种类似的文章我读过。不过我没有查到DNS显色反应的机理和具体反应方程式，请赐教。还有就是改性纤维素链上的醛基会对DNS法造成影响么？

DNS反应式王镜岩生化上册里面就有吧……醛基等还原基团与DNS反应……

DNS反应式及原理，这个网上很好找吧
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5楼2011-10-13 13:17:09
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raaishenghuo

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引用回帖:
5楼: Originally posted by asznpb at 2011-10-13 13:17:09:
DNS反应式王镜岩生化上册里面就有吧……醛基等还原基团与DNS反应……

DNS反应式及原理，这个网上很好找吧

谢谢你的回复。不过我是想问机理的方程式，半乳糖醛基与DNS显色反应，半乳糖醛酸的哪个基团与DNS反应，怎么反应，因为有其它干扰物质存在，我想看看怎么去除干扰物质的影响。
我是想问改性纤维素上的醛基能不能与DNS反应。你说的醛基与DNS反应，是指纤维素大分子链上的醛基能与DNS反应么？因为我想纤维素大分子有氢键，分子还较大，不知能不能与DNS反应。书上说是带有还原性基团的双糖能与DNS反应，纤维素也能么？
请多赐教。
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7楼2011-10-13 21:42:06
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raaishenghuo

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8楼: Originally posted by asznpb at 2011-10-13 22:53:40:
必然是醛基啊，你要是想看那个电子去攻击那个电子取代那个电子轨道什么的，你就自己翻有机化学去吧，那玩意大一学的，早忘记了，纤维素的还原端的确和DNS能反应，但是相对于纤维素的高聚合性而言，几乎可以忽略不 ...

把纤维素氧化了，C2和C3断裂，生成双醛纤维素，这个醛基能与DNS反应么？
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9楼2011-10-14 18:19:06
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