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壮壮0827

新虫 (初入文坛)

[求助] 花粉活力测定实验

有没有哪位大神做过花粉活力检测的同学啊?
我最近在做侧柏花粉活力测定,试了靛蓝染色法,倒是很多都完好的细胞未有被染色,但试了碘-碘化钾染色,TTC染色结果都不理想,得不到文献中的结果:
文献中说碘-碘化钾蓝色(我的是黄褐色,不知道是因为花粉失活了还是因为花粉中含淀粉少,因为看一篇文献说沙地柏的花粉活力测定也有这情况,解释的原因是淀粉含量少)
TTC红色,而我做的花粉没有变色TTC染色,TTC为0.5%,35度10-15min(这个是不是就说明我的花粉失去活力了?我测了这个TTC溶液PH不到7,才5点多,是不是和这个有关,需要用氢氧化钠缓冲液调节一下?网上还有说培养时间的,是否需要延长培养时间?或者更改一下培养温度?)
如果碘-碘钾法和TTC法不能做,我做其他方法,如培养萌发法和醋酸洋红染色法,α-萘酚法(即:过氧化物酶测定法)、荧光法等还有意义么?
不知有没有做过这一块染色的???希望高人指点!!!!
非常感谢!!
很着急啊,做不出来毕不了业了啊……
由于刚来这个论坛,金币较少,希望大家不要嫌弃哦,呵呵
还有就是靛蓝染色法的结果可以说明问题么?

[ Last edited by 壮壮0827 on 2013-3-17 at 21:20 ]
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magy2006

木虫 (著名写手)

帮顶吧
2楼2013-03-18 12:53:55
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aliphonth

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
壮壮0827: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-03-19 13:17:52
你确定收集花粉是有活力的么?有的花粉失活很快的(如水稻)
花粉种类不同, 染色法如碘-碘钾法和TTC法是通过间接指标来测定花粉活力,有时染色活力高但花粉活力低.你可以把花粉杀死后染色,对照新鲜看看是否有区别.
最直接的方法就是花粉萌发法,但培养基要摸条件.
试过柱头萌发么?
3楼2013-03-18 13:27:06
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壮壮0827

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by magy2006 at 2013-03-18 12:53:55
帮顶吧

谢谢你
4楼2013-03-19 13:17:34
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壮壮0827

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by aliphonth at 2013-03-18 13:27:06
你确定收集花粉是有活力的么?有的花粉失活很快的(如水稻)
花粉种类不同, 染色法如碘-碘钾法和TTC法是通过间接指标来测定花粉活力,有时染色活力高但花粉活力低.你可以把花粉杀死后染色,对照新鲜看看是否有区别.
最 ...

非常感谢你的回复!
我的花粉是才采的,我就是不确定花粉是否有活力,担心花粉失去活力了无法实验,所以才想各种测试方法都用一用
你说的先将花粉杀死我准备下午就做
至于萌发法,我昨天做了,没成功,估计不得法,还要再摸索一下
柱头萌发这个太高深了,我初次做实验,水平有限,呵呵
不过我今天调整了TTC的PH值,成功了
5楼2013-03-19 13:22:17
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小雪1989

新虫 (初入文坛)

能不能说说你是咋做的,我也在做花粉的TTC染色,染不上,你的ph是怎么调的?
6楼2013-05-16 23:08:07
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