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pyflxxx

新虫 (小有名气)

[求助] [求助]为什么我的PCR电泳连阳性都跑不出，帮帮我吧。

事情是这样的，我做的 是巢式PCR，要跑两轮PCR才跑电泳。
上周，我试了下，拿以前阳性对照的第一轮PCR产物直接加2ul，电泳跑出了阳性。
这周我又同上周一样做了一次阳性对照，电泳也出阳性了。

可是今天，我拿了几个已知阳性样本，加一个之前跑出来过的阳性对照，做了两轮PCR，电泳连阳性对照都跑不出来。没有条带。

我是拿第一轮PCR产物稀释十倍，再取2ul当做第二轮PCR的模板。

请帮我分析分析是什么问题？

我都要哭了，这说明我之前检测的样本都做得不对。
是试剂有问题吗？如果试剂有问题，我上周直接拿阳性对照跑PCR，取2ul加到，25ul的体系，如果有问题，应该这个跑不出来的吧？
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1楼 2011-09-30 00:08:26
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