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pyflxxx

新虫 (小有名气)

[求助] [求助]为什么我的PCR电泳连阳性都跑不出,帮帮我吧。

事情是这样的,我做的 是巢式PCR,要跑两轮PCR才跑电泳。
上周,我试了下,拿以前阳性对照的第一轮PCR产物直接加2ul,电泳跑出了阳性。
这周我又同上周一样做了一次阳性对照,电泳也出阳性了。

可是今天,我拿了几个已知阳性样本,加一个之前跑出来过的阳性对照,做了两轮PCR,电泳连阳性对照都跑不出来。没有条带。

我是拿第一轮PCR产物稀释十倍,再取2ul当做第二轮PCR的模板。

请帮我分析分析是什么问题?

我都要哭了,这说明我之前检测的样本都做得不对。
是试剂有问题吗?如果试剂有问题,我上周直接拿阳性对照跑PCR,取2ul加到,25ul的体系,如果有问题,应该这个跑不出来的吧?
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