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tutufei

铜虫 (小有名气)

[求助] 质粒线性化对后续酶切有影响吗

提出来的质粒放四度几天发现大部分超螺旋变成线性,会对双酶切有影响吗?
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tutufei

铜虫 (小有名气)

质粒为6273bp,酶切后6242bp,图1为第一次预酶切与质粒对照图,图2为第二次酶切,发现质粒的超螺旋条带变淡,是不是线性化了?

9楼2011-09-22 22:40:08
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小鸟剑客

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): Good! 2011-09-22 11:47:57
我也做过这个,应该会影响的,下次你放-20度吧,-4度不保险的!但是不知道你怎么知道超螺旋消失,至于变成线性我觉得不太可能吧,应该还是环状的吧。建议重提下
2楼2011-09-22 09:05:24
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

amisking: 鼓励应助。 2011-09-22 19:54:16
引用回帖:
1楼: Originally posted by tutufei at 2011-09-22 08:55:38:
提出来的质粒放四度几天发现大部分超螺旋变成线性,会对双酶切有影响吗?

就四度放着超螺旋变成线性,楼主搞错了吧?
3楼2011-09-22 09:51:55
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清风寨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励 2011-09-22 12:32:26
用的试剂盒抽提的质粒么 我觉得不会出现这种情况 不行就重新抽质粒吧双酶切肯定有影响啊、
冷风过心变热
4楼2011-09-22 12:07:57
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