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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 质粒线性化对后续酶切有影响吗
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tutufei

铜虫 (小有名气)

[求助] 质粒线性化对后续酶切有影响吗

提出来的质粒放四度几天发现大部分超螺旋变成线性，会对双酶切有影响吗？
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1楼 2011-09-22 08:55:38
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tutufei

铜虫 (小有名气)
质粒为6273bp，酶切后6242bp，图1为第一次预酶切与质粒对照图，图2为第二次酶切，发现质粒的超螺旋条带变淡，是不是线性化了？
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9楼2011-09-22 22:40:08
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小鸟剑客

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): Good！ 2011-09-22 11:47:57
我也做过这个，应该会影响的，下次你放-20度吧，-4度不保险的！但是不知道你怎么知道超螺旋消失，至于变成线性我觉得不太可能吧，应该还是环状的吧。建议重提下
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2楼2011-09-22 09:05:24
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

amisking: 鼓励应助。 2011-09-22 19:54:16
引用回帖:
1楼: Originally posted by tutufei at 2011-09-22 08:55:38:
提出来的质粒放四度几天发现大部分超螺旋变成线性，会对双酶切有影响吗？

就四度放着超螺旋变成线性，楼主搞错了吧？
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3楼2011-09-22 09:51:55
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清风寨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励 2011-09-22 12:32:26
用的试剂盒抽提的质粒么 我觉得不会出现这种情况 不行就重新抽质粒吧双酶切肯定有影响啊、
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冷风过心变热
4楼2011-09-22 12:07:57
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