24小时热门版块排行榜    

查看: 2524  |  回复: 9

tutufei

铜虫 (小有名气)

[求助] 质粒线性化对后续酶切有影响吗

提出来的质粒放四度几天发现大部分超螺旋变成线性,会对双酶切有影响吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小鸟剑客

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): Good! 2011-09-22 11:47:57
我也做过这个,应该会影响的,下次你放-20度吧,-4度不保险的!但是不知道你怎么知道超螺旋消失,至于变成线性我觉得不太可能吧,应该还是环状的吧。建议重提下
2楼2011-09-22 09:05:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

amisking: 鼓励应助。 2011-09-22 19:54:16
引用回帖:
1楼: Originally posted by tutufei at 2011-09-22 08:55:38:
提出来的质粒放四度几天发现大部分超螺旋变成线性,会对双酶切有影响吗?

就四度放着超螺旋变成线性,楼主搞错了吧?
3楼2011-09-22 09:51:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风寨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励 2011-09-22 12:32:26
用的试剂盒抽提的质粒么 我觉得不会出现这种情况 不行就重新抽质粒吧双酶切肯定有影响啊、
冷风过心变热
4楼2011-09-22 12:07:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tutufei

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小鸟剑客 at 2011-09-22 09:05:24:
我也做过这个,应该会影响的,下次你放-20度吧,-4度不保险的!但是不知道你怎么知道超螺旋消失,至于变成线性我觉得不太可能吧,应该还是环状的吧。建议重提下

原来超螺旋位置的条带变淡,线性位置的条带增亮了
5楼2011-09-22 14:43:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小鸟剑客

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by tutufei at 2011-09-22 14:43:45:
原来超螺旋位置的条带变淡,线性位置的条带增亮了

不太清楚你的意思,你应该传个图上来
6楼2011-09-22 15:36:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

上图吧,还是亲眼看到图片更有助于给你提供好的建议
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
7楼2011-09-22 15:39:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zc10052157

新虫 (正式写手)

超螺旋变成线性这个怎么看出来的啊
hold住
8楼2011-09-22 19:43:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tutufei

铜虫 (小有名气)

质粒为6273bp,酶切后6242bp,图1为第一次预酶切与质粒对照图,图2为第二次酶切,发现质粒的超螺旋条带变淡,是不是线性化了?

9楼2011-09-22 22:40:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-09-23 12:39:06
tutufei(金币+5): 谢谢 2011-09-27 20:46:34
碱法抽提质粒中不含线性DNA,
三条带分别是超螺旋、开环和复制中间体
您说的线性其实是开环的质粒
从你的双酶切(两个酶之间应该相差很少,因为从你的双酶切图上只看到一条带)也能看出来,线性和你说的线性质粒的位置是有差别的。
10楼2011-09-23 04:42:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tutufei 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +8 瞬息宇宙 2026-08-31 15/750 2026-09-02 11:13 by ma0526
[基金申请] 我不理解! +18 Edward_pc 2026-08-26 26/1300 2026-09-02 11:01 by shanzhipu
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
信息提示
请填处理意见