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禁虫 (小有名气)

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1楼 2011-08-26 09:35:00

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arniekyo

铜虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

提取质粒验证一下，就知道是模板的问题还是菌的问题，这样以后做的话心里也有底了，只是个人意见

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6楼2011-08-26 11:22:52

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shuihaizi

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

我认为你的模板量太大了，我做10ul体系的，过夜摇菌，只用0.2ul足够了，效果挺好的。

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2楼2011-08-26 09:50:25

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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

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【答案】应助回帖

你做菌液PCR是想干什么？扩载体上的一段序列还是什么？
还是做克隆验证呢？

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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!

3楼2011-08-26 10:24:49

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xbl3688

银虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

你的胶图中连一点抹带都没有，Marker后面三孔最下端隐约还能看到引物二聚体的影子，我怀疑是模板有问题，就是说假阳性或者摇的菌出了问题（有沉淀，一般刚摇完的菌是没有沉淀的）。
下次做菌液pcr的时候最好拿个已知的目的基因做个正对照，这样就可以排除pcr体系和程序的问题，因为菌液pcr影响因素蛮多的。

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生活的乐趣在于善于发现美，学会欣赏美

5楼2011-08-26 10:42:48

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xbl3688

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