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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good!我们也是挑的菌落,比较省事。 2011-08-26 11:43:50
madengyu(金币+2): 2011-08-26 11:48:38
楼主做菌液PCR验证克隆的话,其实可以这样!
首先根据你描述的体系,模板有些多了,
其实你不用那菌液当模板的,将疑似单克隆划到平板上(一个平板可以划很多),然后挑菌进行裂解,用裂解的菌液当模板,这样岂不是很方便?如果你摇菌的话,确实有些麻烦和费事,如果有疑似10个正确的单克隆,你难道还接10管菌?
我们这里都是挑菌裂解进行PCR验证的,
当然了PCR验证只是一个初步验证连接的检验方法,如果能P出来,那么基本就对了,这时候就需要提个质粒,酶切一下就OK了,国际上还是比较认可酶切的;
当然了没有P出来并不代表没有连接上,有可能是你的PCR问题。。。
所以提取质粒进行酶切还是后期必须的。。。
祝好运!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
7楼2011-08-26 11:29:47
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