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金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4, MolEPI+1): Good 2011-08-14 09:09:32
Fire0304(金币+5): 有帮助,实验后来算是成功了 2011-11-09 00:01:48
引用回帖:
1楼: Originally posted by Fire0304 at 2011-08-12 22:06:32:
初次做western blot,蛋白分子量是57kD,
    第一次试验:浓缩胶4% 80V,分离胶10%,100V, PVDF膜转膜300mA 60min,丽春红染色无条带,封闭2h,一抗1:300,内参抗体1:500,4°C过夜,二抗1:2000,室温1h
     结 ...

前后几次试验的page胶配制情况是否稳定?为何要不停的降低电压?
丽春红有时候不够敏感,染不出来的时候也不能确定就一定没转到膜上
丽春红能染上肯定是电泳和转膜都很不错了。
像你这种情况其实可以分别做2块胶,转2块膜,分别用第一次和第二次转膜的条件来做目的片段和内参。
How about the future?
6楼2011-08-13 22:09:51
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