应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：T4 DNA Polymerase的反应体系以及反应条件~非常感谢··急急急急急急急急~
81/1返回列表
查看: 2930  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

taojun

木虫 (著名写手)

[求助] 求助：T4 DNA Polymerase的反应体系以及反应条件~非常感谢··急急急急急急急急~

我现在需要用T4聚合酶将我的PCR产物从3‘到5’外切至第一个核苷酸A的位置，哪个专家能告诉我反应体系多少比较合适？加dATP，酶，buffer的比例是多少？还有就是反应时间和温度大概多少 非常感谢~非常感谢！！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-11 09:53:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dahhs

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-08-11 18:09:22
taojun(金币+4): 谢谢你的及时回复~ 2011-08-12 10:46:24
taojun(金币+2): 2011-09-11 22:45:10
要看你的T4连接酶是哪家公司的，说明书上有详细的反应条件，dATP 一般1ul .
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-08-11 10:08:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taojun

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dahhs at 2011-08-11 10:08:16:
要看你的T4连接酶是哪家公司的，说明书上有详细的反应条件，dATP 一般1ul .

我用的是takara的酶~说明书上给的反应体系是片段末端平滑化的例子，跟我的实验目的不一样啊~
赞一下 回复此楼
3楼2011-08-11 10:13:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
不懂，帮顶下，顺带学习下
赞一下 回复此楼
4楼2011-08-11 22:30:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taojun

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-08-11 22:30:02:
不懂，帮顶下，顺带学习下

谢谢~嘿嘿
回复此楼
5楼2011-08-12 10:45:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JASON13

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): Good 2011-08-12 18:26:53
taojun(金币+4): 谢谢~我先试试哦 2011-08-19 10:29:45
我用的是NEB的，如下。
     T4 DNA聚合酶处理：按下表操作，混匀后 20-25 度放置 30min，然后 75 度水浴20min，使 T4 DNA聚合酶失活，此时可存于-20 度备用。
赞一下(2人) 回复此楼
结构化生
6楼2011-08-12 17:39:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiewho

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by JASON13 at 2011-08-12 17:39:51
我用的是NEB的，如下。
     T4 DNA聚合酶处理：按下表操作，混匀后 20-25 度放置 30min，然后 75 度水浴20min，使 T4 DNA聚合酶失活，此时可存于-20 度备用。

表呢？
回复此楼
7楼2015-05-17 19:52:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

远方天空

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by JASON13 at 2011-08-12 17:39:51
我用的是NEB的，如下。
     T4 DNA聚合酶处理：按下表操作，混匀后 20-25 度放置 30min，然后 75 度水浴20min，使 T4 DNA聚合酶失活，此时可存于-20 度备用。

亲，能发一下你添加的那个表吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-01-06 23:35:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 taojun 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 什么时候开奖？ +4 CrisMessi 2026-08-18 4/200 2026-08-19 00:53 by gatelove
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 27/1350 2026-08-18 21:44 by Noways
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +3 瞬息宇宙 2026-08-15 3/150 2026-08-18 21:40 by xiaohuixin
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 9/450 2026-08-18 20:09 by 奶牛小黑
[基金申请] 朋友圈看到的 +4 wangzilk 2026-08-18 5/250 2026-08-18 19:25 by wangzilk
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +8 基诺咪客 2026-08-17 11/550 2026-08-18 17:13 by 悠然熊猫
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +9 yuleib84 2026-08-18 10/500 2026-08-18 16:52 by archvillain
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭