应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：T4 DNA Polymerase的反应体系以及反应条件~非常感谢··急急急急急急急急~
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 2802  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

taojun

木虫 (著名写手)

[求助] 求助：T4 DNA Polymerase的反应体系以及反应条件~非常感谢··急急急急急急急急~

我现在需要用T4聚合酶将我的PCR产物从3‘到5’外切至第一个核苷酸A的位置，哪个专家能告诉我反应体系多少比较合适？加dATP，酶，buffer的比例是多少？还有就是反应时间和温度大概多少 非常感谢~非常感谢！！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-11 09:53:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dahhs

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-08-11 18:09:22
taojun(金币+4): 谢谢你的及时回复~ 2011-08-12 10:46:24
taojun(金币+2): 2011-09-11 22:45:10
要看你的T4连接酶是哪家公司的，说明书上有详细的反应条件，dATP 一般1ul .
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-08-11 10:08:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taojun

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dahhs at 2011-08-11 10:08:16:
要看你的T4连接酶是哪家公司的，说明书上有详细的反应条件，dATP 一般1ul .

我用的是takara的酶~说明书上给的反应体系是片段末端平滑化的例子，跟我的实验目的不一样啊~
赞一下 回复此楼
3楼2011-08-11 10:13:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
不懂，帮顶下，顺带学习下
赞一下 回复此楼
4楼2011-08-11 22:30:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taojun

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-08-11 22:30:02:
不懂，帮顶下，顺带学习下

谢谢~嘿嘿
回复此楼
5楼2011-08-12 10:45:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JASON13

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): Good 2011-08-12 18:26:53
taojun(金币+4): 谢谢~我先试试哦 2011-08-19 10:29:45
我用的是NEB的，如下。
     T4 DNA聚合酶处理：按下表操作，混匀后 20-25 度放置 30min，然后 75 度水浴20min，使 T4 DNA聚合酶失活，此时可存于-20 度备用。
赞一下(2人) 回复此楼
结构化生
6楼2011-08-12 17:39:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiewho

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by JASON13 at 2011-08-12 17:39:51
我用的是NEB的，如下。
     T4 DNA聚合酶处理：按下表操作，混匀后 20-25 度放置 30min，然后 75 度水浴20min，使 T4 DNA聚合酶失活，此时可存于-20 度备用。

表呢？
回复此楼
7楼2015-05-17 19:52:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

远方天空

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by JASON13 at 2011-08-12 17:39:51
我用的是NEB的，如下。
     T4 DNA聚合酶处理：按下表操作，混匀后 20-25 度放置 30min，然后 75 度水浴20min，使 T4 DNA聚合酶失活，此时可存于-20 度备用。

亲，能发一下你添加的那个表吗？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2017-01-06 23:35:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 taojun 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿211生物学280分 求调剂 +4 李rien 2026-04-05 4/200 2026-04-05 18:01 by kk112233
[考研] 材料专硕 调剂 +14 CXN123456 2026-04-03 14/700 2026-04-05 17:18 by Hdyxbekcb
[考研] 298分 070300求调剂 +15 zwen03 2026-04-02 15/750 2026-04-05 12:52 by Hdyxbekcb
[考研] 一志愿南航，数一英一学硕317求调剂！！ +5 Acaciad 2026-04-04 5/250 2026-04-05 12:31 by 搏击518
[考研] 材料工程085601数二英一335求调剂 +6 双马尾痞老板2 2026-03-31 6/300 2026-04-04 22:29 by hemengdong
[考研] 306求调剂 +3 hyb上名工 2026-04-02 3/150 2026-04-04 18:12 by 热情沙漠
[考研] 一志愿085404，总分291，四级已过，求调剂 +5 阿俊阿俊阿俊 2026-04-04 7/350 2026-04-04 13:23 by 莲菜就是藕吧
[考研] 268求调剂 +8 你好tg 2026-04-03 9/450 2026-04-04 05:08 by gswylq
[考研] 317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂 +6 YinTai 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:30 by 无际的草原
[考研] 一志愿中国石油大学化学工程323分求调剂 +4 化工专硕323分 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:12 by dongzh2009
[考研] 化工调剂303分，过四级 +28 栖梧待风 2026-04-02 28/1400 2026-04-03 21:40 by qlm5820
[考研] 考研调剂 +3 Draa 2026-04-03 3/150 2026-04-03 17:37 by hgwz7468
[考研] 338求调剂 +4 zzz，，r 2026-04-03 4/200 2026-04-03 16:39 by lijunpoly
[硕博家园] 求老师收留 +9 lllq123 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:48 by 呼吸都是减肥
[考研] 0703化学 +7 goldtt 2026-04-02 9/450 2026-04-03 09:36 by 蓝云思雨
[考研] 085602化工求调剂（331分） +9 111@127 2026-03-30 9/450 2026-04-02 20:00 by dick_runner
[考研] 279求调剂 +6 学而思兮知 2026-04-01 6/300 2026-04-02 09:16 by vgtyfty
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:04 by oooqiao
[考研] 土木304求调剂 +5 顶级擦擦 2026-03-31 5/250 2026-04-01 08:15 by fdcxdystjk￥
[考研] 335求调剂 +3 321* 2026-03-31 4/200 2026-04-01 00:00 by 321*
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭