| 查看: 2816 | 回复: 8 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
提质粒的问题
|
|||
下图是我提的两次质粒。1、2泳道提的效果很差，不知道提出来的这个条带是缺刻还是双螺旋？3、4泳道条带是明显的，但是不清楚红线圈内的条带是什么。希望大家帮我解释下。 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有66人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 新手求助——质粒电泳条带问题
已经有15人回复
- 做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why???
已经有24人回复
- 酶切问题求助
已经有8人回复
- 提质粒出现4条带？
已经有15人回复
- 提质粒遇到问题
已经有13人回复
- 重组质粒双酶切问题
已经有5人回复
- 提质粒浓度太小，条带不亮，有图求真相
已经有20人回复
- 请教大家一个问题--提质粒
已经有8人回复
- 【求助/交流】片段转进去，提质粒酶切发现载体小了，想不明白
已经有19人回复
- 【求助/交流】提质粒后跑的电泳图
已经有10人回复
w2boluo
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 4
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2006.6
- 红花: 1
- 帖子: 85
- 在线: 356.3小时
- 虫号: 1083233
- 注册: 2010-08-27
- 性别: GG
- 专业: 植物生殖生物学
【答案】应助回帖
liuwei78(金币+5): 2011-09-08 16:25:34
|
楼主这个图可以说提得惨不忍睹。1，2的产量太低，带型位置也更接近于缺刻质粒；3，4的杂质含量太高。所谓的质粒3条带应该都在超螺旋质粒的上方，下方出现很淡的带，按分子克隆的说法，属于质粒在强变性条件下处理过长，变成无规则卷曲构象，电泳大小约为正常带型的一半。这种情况多见于煮沸法，碱法提取质粒在加入溶液II，也就是NaOH+SDS溶液后静置时间过长也会出现，现在的试剂盒多采用减法，加入裂解液后溶液变澄清即可马上加入中和液（溶液III），不必等待。但这种变形带型对后续实验基本无影响，也可以完全不理它。 给楼主的建议：注意一下菌体的浓度以及和抽提液的比例，3，4这样的泳道应该记下所用的原始培养基的体积，下次提取的时候减半；电泳marker不要用DL2000，差的比较远。 |
9楼2011-08-09 10:38:31
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16332.8
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3652
- 在线: 289小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
2楼2011-08-03 11:59:25
hqchlorella
铜虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 240.2
- 帖子: 71
- 在线: 55.8小时
- 虫号: 1253398
- 注册: 2011-04-02
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
；3楼2011-08-03 12:11:00
4楼2011-08-03 12:56:33
