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陈青chenqing

铜虫 (初入文坛)

[求助] 怎样跑出电泳图很漂亮？？！！

就感觉自己每次跑出的marker 都不好看   更别说样品了  条带总是歪歪扭扭的  波浪形   也不知道和什么有关？还有为什么样品经常会有拖尾呢？
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自己的未来自己创造！
1楼 2011-07-09 14:17:00
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
2楼2011-07-09 18:21:00
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ureyguo

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-10 08:24:32
是目的条带是波浪形吗？要是的话，你用的loading buffer是不是10x的，用6x的应该就可以解决！祝好运！
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3楼2011-07-09 22:51:11
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双螺旋DNA

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-07-14 07:54:50
把所有的电泳的缓冲液换一下，然后可以适当把胶浓度提高，再用小一点的电压<90V 跑试一下，祝好运
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4楼2011-07-11 14:15:17
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caomingle

金虫 (正式写手)

皇冠

【答案】应助回帖

是不是点样的时候有气泡啊？
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乐乐
5楼2011-07-11 14:52:00
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yanhui8558

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): Good 2011-07-13 22:14:32
陈青chenqing(金币+1): 是agarose 不是page哦 2011-09-11 22:56:00
跑分离胶时把电压调低，130-140就可以，还有就是你的胶可能制的不齐，要不就是上样量不一致
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6楼2011-07-11 15:06:58
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caisanrenju

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-07-13 22:14:41
我想说的是，注意你的running buffer，干净无沉淀
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7楼2011-07-11 16:09:12
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qianqian_me

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): good 2011-07-13 22:15:37
你指的拖尾，指的是目的条带上有大片背景还是目的条带之下？  如果之上，可能原因，如果上的样品是PCR产物，则目的条带之上的背景为PCR非特异性扩增产物，需要提高Annealing Tm. 提高特异性。 还有一个操作原因，电泳时间较长，一般为100V，30分钟或者130V，20分钟。  
如果是目的条带之下有大片背景， 我遇到过一次， 是质粒限制性酶切以后出现的，这个原因为，质粒或者你的DNA被核酸酶污染，造成非特异性消化后出现的众多条带。一般分不出清晰的条带，只是大片比较均一的，英语称为smear image。
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不放弃就会有希望！相信坚持的力量！
8楼2011-07-11 17:35:19
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丑牛1973

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-07-13 22:15:47
溶胶的时候要彻底，拔梳子的时候往里倒点电泳缓冲液
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9楼2011-07-13 09:43:30
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chenlin022

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励 2011-07-13 22:15:57
跑胶的时候将电泳缓冲液冷却到4摄氏度。低温电泳有助于条带的完美哦！
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10楼2011-07-13 10:29:11
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