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陈青chenqing

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 怎样跑出电泳图很漂亮？？！！

就感觉自己每次跑出的marker 都不好看更别说样品了条带总是歪歪扭扭的波浪形也不知道和什么有关？还有为什么样品经常会有拖尾呢？

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自己的未来自己创造！

1楼 2011-07-09 14:17:00

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qianqian_me

铁虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): good 2011-07-13 22:15:37

你指的拖尾，指的是目的条带上有大片背景还是目的条带之下？如果之上，可能原因，如果上的样品是PCR产物，则目的条带之上的背景为PCR非特异性扩增产物，需要提高Annealing Tm. 提高特异性。还有一个操作原因，电泳时间较长，一般为100V，30分钟或者130V，20分钟。
如果是目的条带之下有大片背景，我遇到过一次，是质粒限制性酶切以后出现的，这个原因为，质粒或者你的DNA被核酸酶污染，造成非特异性消化后出现的众多条带。一般分不出清晰的条带，只是大片比较均一的，英语称为smear image。