应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切体系是什么意思
51/1返回列表
查看: 3300  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xuqingchun33

银虫 (小有名气)

[求助] 双酶切体系是什么意思

各位大侠，请问一下下面的这个双酶切体系是什么意思？能否举个例子，谢谢
Double Digestion with BamHI, NdeI
We recommend:
Buffer 2X Tango?
2-fold excess of BamHI
2-fold excess of NdeI
Incubate at 37°C
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
在这个纷绕的世俗世界里，能够学会用一颗平常的心去对待周围的一切，也是一种境界。
1楼 2011-07-02 11:26:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): Good!讲得很清楚了！ 2011-07-02 16:48:36
xuqingchun33(金币+1): 2011-07-03 12:49:56
引用回帖:
Originally posted by xuqingchun33 at 2011-07-02 11:26:42:
各位大侠，请问一下下面的这个双酶切体系是什么意思？能否举个例子，谢谢
Double Digestion with BamHI, NdeI
We recommend:
Buffer 2X Tango?
2-fold excess of BamHI
2-fold excess of NdeI
Incubate at  ...

一看就知道楼主用的是fermentas公司的限制性内切酶。
Double Digestion with BamHI, NdeI就是选择的酶是BamHI, NdeI。
We recommend:
Buffer 2X Tango该公司推荐使用的酶切缓冲液是2X Tango，就是加酶切体系总体积的1/5的10X Tango。
2-fold  excess of BamHI
2-fold excess of NdeI因为这两个酶在2X Tango条件下活性都只有50-100%，不是100%，为了保证切割效率，所以加入的酶量是2倍。
Incubate at 37°C 这个就是酶切温度了。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-07-02 16:09:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

zsy1106

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 似的 2011-07-02 15:42:24
意思就是用BamHI, NdeI两个酶去切呀。
后面是推荐的酶切条件（buffer浓度、酶量、酶切温度）。
楼主想问什么啊？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-07-02 15:26:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuifen1108

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 分成几段不一定啊 2011-07-02 15:42:39
就是用两个酶BamHI和NdeI去切质粒，将环形的质粒分成两段线性的DNA片段
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-07-02 15:38:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青菜小虫

银虫 (著名写手)

风居住的街道

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5): 鼓励分享经验。水浴这个缺点第一次听说，学习了！ 2011-07-02 17:54:28
xuqingchun33(金币+1): 2011-07-03 12:50:03
我也用fermentas公司的限制性内切酶。一般40ul  体系的话，10X Tango 8ul， BamHI, NdeI各0.8ul 。37°C放培养箱酶切过夜就可，或3-4小时，不建议水浴，因为离心管上下部温度不一致，还造成挥发。
赞一下(2人) 回复此楼
生命即这般无尽变数，辗转来去皆苛求不得
5楼2011-07-02 17:17:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-21 6/300 2026-03-22 11:35 by plum李子
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +4 2117205181 2026-03-21 5/250 2026-03-22 11:30 by 杨杨杨紫
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 求调剂 +5 十三加油 2026-03-21 5/250 2026-03-21 18:48 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工（0856）304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +5 tcxiaoxx 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:35 by laoshidan
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭