应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切体系是什么意思
51/1返回列表
查看: 3301  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xuqingchun33

银虫 (小有名气)

[求助] 双酶切体系是什么意思

各位大侠，请问一下下面的这个双酶切体系是什么意思？能否举个例子，谢谢
Double Digestion with BamHI, NdeI
We recommend:
Buffer 2X Tango?
2-fold excess of BamHI
2-fold excess of NdeI
Incubate at 37°C
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
在这个纷绕的世俗世界里，能够学会用一颗平常的心去对待周围的一切，也是一种境界。
1楼 2011-07-02 11:26:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuifen1108

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 分成几段不一定啊 2011-07-02 15:42:39
就是用两个酶BamHI和NdeI去切质粒，将环形的质粒分成两段线性的DNA片段
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-07-02 15:38:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

zsy1106

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 似的 2011-07-02 15:42:24
意思就是用BamHI, NdeI两个酶去切呀。
后面是推荐的酶切条件（buffer浓度、酶量、酶切温度）。
楼主想问什么啊？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-07-02 15:26:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): Good!讲得很清楚了！ 2011-07-02 16:48:36
xuqingchun33(金币+1): 2011-07-03 12:49:56
引用回帖:
Originally posted by xuqingchun33 at 2011-07-02 11:26:42:
各位大侠，请问一下下面的这个双酶切体系是什么意思？能否举个例子，谢谢
Double Digestion with BamHI, NdeI
We recommend:
Buffer 2X Tango?
2-fold excess of BamHI
2-fold excess of NdeI
Incubate at  ...

一看就知道楼主用的是fermentas公司的限制性内切酶。
Double Digestion with BamHI, NdeI就是选择的酶是BamHI, NdeI。
We recommend:
Buffer 2X Tango该公司推荐使用的酶切缓冲液是2X Tango，就是加酶切体系总体积的1/5的10X Tango。
2-fold  excess of BamHI
2-fold excess of NdeI因为这两个酶在2X Tango条件下活性都只有50-100%，不是100%，为了保证切割效率，所以加入的酶量是2倍。
Incubate at 37°C 这个就是酶切温度了。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-07-02 16:09:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青菜小虫

银虫 (著名写手)

风居住的街道

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5): 鼓励分享经验。水浴这个缺点第一次听说，学习了！ 2011-07-02 17:54:28
xuqingchun33(金币+1): 2011-07-03 12:50:03
我也用fermentas公司的限制性内切酶。一般40ul  体系的话，10X Tango 8ul， BamHI, NdeI各0.8ul 。37°C放培养箱酶切过夜就可，或3-4小时，不建议水浴，因为离心管上下部温度不一致，还造成挥发。
赞一下(2人) 回复此楼
生命即这般无尽变数，辗转来去皆苛求不得
5楼2011-07-02 17:17:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 275求调剂 +5 shansx 2026-03-22 6/300 2026-03-22 13:01 by zhanglang93
[考研] 招08考数学 +3 laoshidan 2026-03-20 7/350 2026-03-22 12:54 by 在风落中
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 4/200 2026-03-22 11:04 by 搏击518
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 333求调剂 +5 87639 2026-03-21 7/350 2026-03-21 19:31 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 306求调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-18 4/200 2026-03-21 08:25 by laoshidan
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 324求调剂 +5 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 5/250 2026-03-20 22:30 by 促天成
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 5/250 2026-03-20 22:11 by 云游重阳
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭